Forudsigelse af mekanisme og verifikation af Cistanche Deserticola til behandling af inflammatorisk tarmsygdom ⅱ
Nov 15, 2024
| Forbindelsesnavn (kinesisk) | TCMSP ID | Molekylvægt | Oral biotilgængelighed |
|---|---|---|---|
| -sitosterol (植物甾醇) | Mol000358 | 36.91 | 0.75 |
| Anchidonolol (安诺炼) | MOL005320 | 45.57 | 0.20 |
| Suchillinolol (苏沟酚) | MOL005384 | 57.52 | 0.56 |
| Yangambul (杨安补) | Mol007563 | 57.53 | 0.81 |
| quercitrin (æblefyld) | MOL000098 | 46.43 | 0.28 |
| Myricetin (桑椹素) | Mol001454 | 37.05 | 0.68 |
| Acetosid (毛蕨花酷) | Mol003333 | 2.94 | 0.62 |
| ecdisteroid (脱皮激素) | Mol003734 | 3.14 | 0.38 |
| poliumosid (金合欢苷) | Na | Na | Na |
| cistanosid A (肥皂树 a) | Mol008856 | 3.62 | 0.36 |
| Cistanosid B (肥皂树 B) | Mol008872 | 4.27 | 0.35 |
| cistanosid C (肥皂树 C) | Na | Na | Na |
| Cistanosid D (肥皂树 D) | Mol008882 | 5.19 | 0.69 |
| tubulosid A (管花草 a) | Na | Na | Na |
| Tubulosid B (管花草 B) | Na | Na | Na |
| isoacreosid (异亮菊花菊草) | Mol107795 | 1.52 | 0.66 |
| 2- acetylacteosid (乙酰柠檬晶) | Na | Na | Na |
| L-arabinose (l- 阿拉伯糖) | MOL010200 | 54.12 | 0.03 |
| Galactosid (半乳糖) | MOL010203 | 10.22 | 0.55 |
| dulciol (halvmælk) | Na | Na | Na |
| D-glucarsyre (D- 葡萄糖酸) | Mol012957 | 60.80 | 0.06 |
| Mannitol (甘露醇) | Mol000003 | 17.73 | 0.03 |
| fruktose (果糖) | MOL000053 | 1.68 | 0.03 |
| xylose (xylose) | Mol000731 | 58.74 | 0.03 |
| glukose (葡萄糖) | Mol000734 | 24.44 | 0.03 |
| Rhamnose (鼠李糖) | MOL004690 | 40.73 | 0.03 |
| Sucrose (蔗糖) | Mol000842 | 7.17 | 0.23 |
| Mannose (甘露糖) | Mol000951 | 1.76 | 0.03 |
Her er tabellen oversat til engelsk:
| Forbindelsesnavn (kinesisk) | TCMSP ID | Molekylvægt | Oral biotilgængelighed |
|---|---|---|---|
| fruktose (果糖) | MOL000053 | 1.68 | 0.03 |
| xylose (xylose) | Mol000731 | 58.74 | 0.03 |
| glukose (葡萄糖) | Mol000734 | 24.44 | 0.03 |
| Rhamnose (鼠李糖) | MOL004690 | 40.73 | 0.03 |
| Sucrose (蔗糖) | Mol000842 | 7.17 | 0.23 |
| Mannose (甘露糖) | Mol000951 | 1.76 | 0.03 |
| cistanin (cistanin) | Mol008855 | 71.78 | 0.06 |
| Cistachlorin (肉桂苷素) | Na | Na | Na |
| Kankanosid a (甘菊苷 a) | Na | Na | Na |
| Kankanosid B (甘菊苷 B) | Na | Na | Na |
| 8- epilogansyre (8- 表乙酸) | Mol003203 | 98.51 | 0.09 |
| Glucosid (榈苷) | Na | Na | Na |
| Liriodendrin (鹤掌枫脂素) | Mol007927 | 5.19 | 0.29 |
| Citrusin A (柑橘素 A) | Mol013438 | 25.04 | 0.73 |
| palmitinsyre (棕榈酸) | Mol000069 | 19.30 | 0.10 |
| Niacin (烟酸) | Mol000421 | 47.65 | 0.02 |
Figur 1 "Drug-ingredient-target-sygdom" Interaktionsnetværk
3.1.4 Gå og KEGG -berigelsesanalyse
Som vist i figur 3 og 4 er den biologiske proces af Cistanche Deserticola til behandling af IBD hovedsageligt relateret til proteinphosphorylering, negativ regulering af apoptose, respons på eksogen stimuli osv., Hovedsageligt involverer signalveje, såsom PI3K/Akt og EGFR tyrosine kinase -inhibitorresistens.
3.1.5 Molekylær dockingbekræftelse
Molekylære docking -verifikationsresultater (tabel 2) viser, at bindingsenergierne i kernemålet og kernekomponenterne alle er mindre end -4. 7 kJ/mol, hvilket indikerer, at ligandmolekylerne kan binde godt til receptorproteinet. Blandt dem er den bindende energi fra Akt1 og -sitosterol den bedste kombination.
Ny urtcistanche oralt supplement til forstoppelse
Støttende service af Wecistanche-den største cistanche-eksportør i Kina:
E -mail: wallence.suen@wecistanche.com
Whatsapp/tlf: +86 15292862950
3.2 Resultater af dyreforsøg
3.2.1 Effekt af CE på musens kropsvægt
Sammenlignet med den tomme kontrolgruppe blev kropsvægten af mus i modelgruppen signifikant reduceret (p ＜ {{0}}. 0 1); Sammenlignet med modelgruppen blev kropsvægten af mus i den positive kontrolgruppe og CE -dosisgrupper signifikant forøget (P ＜ 0,05 eller P ＜ 0,01). Resultaterne er vist i tabel 3.
Figur 4 Kegg Pathway Analyse af potentielle mål for Cistanche Deserticola i behandlingen af IBD
Tabel 2 dockingresultater af kernekomponenter og kerne målproteiner (KJ/mol)
| Forbindelse | Tnf | Acti | Stat3 | EGFR | Src |
|---|---|---|---|---|---|
| Oleanolsyre | -6.2 | -10.0 | -7.9 | -7.6 | -8.6 |
| Ursolsyre | -5.2 | -10.0 | -8.0 | -7.7 | -8.0 |
| Glycyrrhetinsyre | -6.4 | -11.3 | -8.0 | -9.2 | -8.3 |
| 18 - glycyrrhetinsyre | -4.8 | -6.8 | -5.2 | -4.8 | -5.5 |
Tabel 3 kropsvægt, dai, tyktarmslængde og patologisk score for mus i hver gruppe (x ± s)
| Gruppe | n | Vægt (g) | Kropslængde (CM) | Dai (%) | Patologisk score |
|---|---|---|---|---|---|
| Kontrollere | 8 | 20.84 ± 0.61 | 7.48 ± 0.18 | 0 | 0.13 ± 0.22 |
| Model | 7 | 14.24 ± 0.92a | 5.77 ± 0.35* | 3.30 ± 0.50* | 2.85 ± 0.61* |
| Lav dosis | 7 | 17.59 ± 0.75b | 7.47 ± 0.70b | 1.99 ± 0.45b | 0.93 ± 0.36b |
| CE lav dosis | 7 | 16.23 ± 0.99b | 7.27 ± 0.42b | 2.66 ± 0.48b | 2.22 ± 0.60b |
| CE Mellemdosis | 8 | 17.07 ± 0.67b | 7.37 ± 0.34b | 2.06 ± 0.31b | 1.51 ± 0.29b |
| CE høj dosis | 8 | 17.37 ± 0.41b | 7.43 ± 0.62b | 1.85 ± 0.43b | 1.13 ± 0.77b |
A: Sammenlignet med kontrolgruppen, s<0.01; b: Compared to the model group, P<0.01; c: Compared to the model group, P<0.05.
3.2.2 Effekt af CE på musen dai og tyktarmslængde
Sammenlignet med den tomme kontrolgruppe blev DAI af mus i modelgruppen markant forøget, og tyktarmslængden blev markant forkortet (P<0.01); compared with the model group, the DAI of rats in the positive control group and CE groups at each dose was significantly reduced, and the colon length was significantly shortened (P<0.01). All increased significantly (P＜0.05 or P＜0.01). The results are shown in Table 3 and Figure 5.
3.2.3 Effekter af CE på histopatologisk morfologi af musekolon
Musens tyktarmslimhinde i den tomme kontrolgruppe var komplet og klar i strukturen, og der blev ikke fundet nogen inflammatorisk celleinfiltration og mavesår; Kolonslimhinden hos musene i modelgruppen var ufuldstændig, de fleste af kirtlerne blev ødelagt, nogle bægerceller forsvandt, og kryptstrukturen blev ødelagt; Sammenlignet med modellen, der sammenlignede grupperne, blev musens kolonisskade i den positive kontrolgruppe og CE -grupperne forbedret, den inflammatoriske celleinfiltration og ødelæggelse af kirtel i tyktarmvæv<0.01). The results are shown in Figure 6 and Table 3.
3.2.4 Effekt af CE på niveauerne af inflammatoriske faktorer i musekolonvæv
Sammenlignet med den tomme kontrolgruppe blev niveauerne af IL {{0}}, IL -1, Mpo og Tnf- i kolonvævet hos mus i modelgruppen signifikant forøget (p ＜ 0 Niveauet af IL -10 blev signifikant reduceret. (P <0,01); Sammenlignet med modelgruppen blev niveauerne af IL -6, IL -1, MPO og TNF- i kolonvævet hos mus i den positive kontrolgruppe og CE-grupper signifikant reduceret (P <0,05 eller P <0,01), IL -10}
Niveauet blev signifikant forøget (p ＜ 0. 01). Resultaterne er vist i tabel 4.
3.2.5 Ekspressionsniveauer af kerne målproteiner i musekolonvæv
Sammenlignet med den tomme kontrolgruppe blev proteinekspressionsniveauerne af PI3K, P-PI3K, EGFR, TNF-, STAT3, P-STAT3, Akt1, P-Akt1 og SRC i kolonvævet hos mus i modelgruppen markant forøget (P< 0.05 or P＜0.01); compared with the model group, the expression levels of the above proteins in the colon tissue of mice in the positive control group and CE groups were significantly reduced (P＜0.05 or P＜0.01).
Resultaterne er vist i figur 7 og tabel 5.
Tabel 4 Sammenligning af inflammatoriske faktorniveauer i musekolonvæv (x ± s)
| Gruppe | n | IL -10 (PG/ML) | IL -6 (PG/ML) | IL -1 (PG/ML) | TNF- (PG/ML) | MPO (U/L) |
|---|---|---|---|---|---|---|
| Kontrollere | 8 | 47.0 ± 4.70 | 17.35 ± 0.64 | 291.27 ± 72.33 | 387.71 ± 116.76 | 23.06 ± 7.26 |
| Model | 7 | 3.68 ± 0.32a | 145.08 ± 23.86a | 338.94 ± 95.11a | 635.27 ± 135.15a | 97.06 ± 28.07a |
| Lav dosis | 7 | 44.74 ± 8.34b | 23.23 ± 4.64b | 300.52 ± 84.71b | 448.21 ± 123.28b | 38.60 ± 16.78b |
| CE lav dosis | 7 | 12.87 ± 3.26b | 81.12 ± 18.95b | 331.24 ± 95.80b | 510.81 ± 110.63b | 51.61 ± 11.62b |
| CE Mellemdosis | 8 | 21.80 ± 4.12b | 50.75 ± 22.16b | 323.62 ± 79.21b | 508.68 ± 146.97b | 45.53 ± 15.21b |
| CE høj dosis | 8 | 31.10 ± 7.40b | 27.55 ± 41.22b | 294.13 ± 86.05b | 461.42 ± 140.30b | 44.26 ± 13.58b |
A: Sammenlignet med kontrolgruppen, s<0.01; b: Compared to the model group, P<0.01.
A: Blank Control Group; B: Modelgruppe; C: Positiv kontrolgruppe; D: CE højdosis gruppe; E: CE-medium-dosis-gruppe; F: CE lavdosis gruppe.
Figur 7 Elektroforese af kerneproteinekspression i kolonvæv af mus i hver gruppe
4 Diskussion
I denne undersøgelse viste resultaterne af molekylære dockingeksperimenter, at kernekomponenterne quercetin, suzilid, -sitosterol og cistanche glycosid H udviste stærk bindingsevne til kernemålene TNF, Akt1, STAT3, EGFR og Src. Det afspejler de synergistiske egenskaber ved Cistanche Deserticolas multi-komponenter og multi-targets.
Undersøgelser har vist, at quercetin signifikant kan hæmme sekretion og frigivelse af inflammatoriske faktorer og inflammatoriske mediatorer og har gode antiinflammatoriske virkninger [17]. Suzilid kan effektivt fremme sekretionen af gamma-interferon af immunceller og har effekten af at øge vitaliteten af immunceller og reducere tumorcellernes levedygtighed. Suzilid og quercetin har også den virkning af at fremme sekretionen af gamma-interferon af immunceller. Synergy [18].
-Sitosterol kan lindre udviklingen af colitis ved at nedregulere niveauerne af inflammatoriske faktorer, såsom IL -6, IL -1 og TNF- [19]. Cistancheside H kan regulere oxidativ stress og inflammatoriske responser gennem signalveje, såsom glycerophospholipidmetabolisme og arachidonsyremetabolisme [20].
Det kan ses, at quercetin, suzilid, -sitosterol og cistanche glycosid H kan være det materielle grundlag for cistanche ørkener i behandlingen af IBD.
KEGG -sti -analyse viste, at Cistanche Deserticola spiller en terapeutisk effekt på IBD hovedsageligt gennem regulering af signalveje, såsom PI3K/AKT og EGFR tyrosinkinaseinhibitorresistens. Undersøgelser har påpeget, at aktivering af PI3K/Akt -signalvejen kan fremme frigivelse af inflammatoriske faktorer og forårsage inflammatorisk skade [21].
SRC er det opstrøms signalmolekyle af PI3K/Akt -signalvejen. DSS, der kommer ind i celler, kan hurtigt aktivere SRC/PI3K/Akt -signalvejen og fremme rekrutteringen af medfødte immunceller, såsom makrofager og neutrofiler til inflammatoriske beskadigede væv, og derved fremskynde frigivelsen af inflammatoriske faktorer forværrer kroppens inflammatoriske respons [22].
EGFR kan phosphoryleres ved binding til opstrømsrelaterede proteiner, aktiverer PI3K/Akt -signalvejen og samarbejder derefter med WNT -signalvejen for at formidle inflammatoriske responser [23]. Akt1 kan aktivere nukleær faktor KB og derved fremme syntesen og frigivelse af pro-inflammatoriske faktorer og fremskynde den inflammatoriske respons [24].
STAT3 er det centrale målprotein for JAK/STAT -signalvejen. Når STAT3 hurtigt er aktiveret, kan den fremskynde frigivelsen af inflammatoriske faktorer, såsom IL -6 og IL -1, hvilket fører til en stigning i inflammatorisk infiltration [25]
. TNF- er den første cytokin, der er frigivet i immunresponsen, kan formidle tarmbetændelse gennem forskellige mekanismer og kan også direkte inducere tarmepitelcelle-apoptose [26].
Det kan ses, at TNF-, AKT1, STAT3, EGFR og SRC kan være de centrale mål for Cistanche Deserticola i behandlingen af IBD. Yderligere dyreeksperimenter fandt, at CE kan reducere ekspressionsniveauerne for ovennævnte proteiner, hvilket beviser nøjagtigheden af netværkets farmakologiske målforudsigelse.
Sammenfattende bekræftede denne undersøgelse systematisk virkningen af Cistanche Deserticola i behandlingen af IBD gennem netværksfarmakologi og dyreforsøg. Dens specifikke virkningsmekanisme kan være relateret til reguleringen af SRC/EGFR/PI3K/AKT -signalvejen.
