Cistanche-baserede kapsler lindrer kronisk ikke-bakteriel prostatitis hos rotter ved at modulere tarmmikrobiota, serummetabolitter og SPHK1/S1P1/PI3K/Akt-signalvejen

3.5 Serummetabolomisk analyse af CBC i EAP-rotter

3.5.1 Multivariat statistisk analyse af fækal metabolomik

Principal komponentanalyse (PCA) afslørede klare gruppeadskillelser under positiv iontilstand blandt denormale, model- og højdosis CBC-grupper, medCBC gruppe klynger tættere på den normale gruppeog længere fra modelgruppen. Under negativ ion-tilstand blev der observeret delvist overlap mellem normal- og modelgrupperne, mens CBC-behandlede prøver stadig udviste god skelnen (figur 5).

Partiel mindste kvadraters diskriminantanalyse (PLS-DA) bekræftede en stærk klassificeringseffekt på tværs af alle tre grupper under begge ioniseringstilstande. De200 gange permutationstestvaliderede modellens pålidelighed, med enQ² skæringspunkt under 0,05, hvilket indikerer ingen overpasning. En nedadgående tendens iR² og Q² værdierlangs X-aksen bekræftede yderligere modelstabilitet (figur 6).

CISTANCHE-BASERET FORMELTE

Køb nu

 

 

 

 

 

3.5.2 Identifikation af differentielle metabolitter påvirket af CBC

Differentielle serummetabolitter blev filtreret baseret påVIP > 1fra PLS-DA,fold ændring Større end eller lig med 1, ogp < 0,05. Efter at have udelukket eksogene forbindelser,10 signifikante endogene metabolitterblev identificeret (tabel 9).

 

3.5.3 KEGG Pathway Enrichment Analysis

KEGG-berigelsesanalyse af de differentielle metabolitter indikerede detCBC-behandling kan modulere vigtige metaboliske vejeinvolveret i kronisk prostatitis. De berigede veje omfattede:

Sphingolipid metabolisme

Retinol metabolisme

Glycin, serin og threonin metabolisme

Glycerophospholipid metabolisme

Arakidonsyre metabolisme(Figur 7)

Disse veje er kendt for at spille en vigtig rolle iimmunregulering, oxidativt stress og inflammation.

3.5.4 Korrelation mellem differentielle metabolitter og tarmmikrobiota

Spearman korrelationsanalyse blev udført mellem de 10 differentielle metabolitter og signifikant ændrede bakterielle taxa. Bemærkelsesværdige sammenhænge inkluderede:

PA(6-keto-PGF1 /i-20:0): positivt korreleret medLactobacillusogRomboutsia ilealis, negativt medNeglectibacter timonensis

SM[d16:2/20:4-2OH]: positivt korreleret medParaprevotella claraogRomboutsia ilealis

PS[18:1/20:0]: positivt korreleret medRomboutsia ilealis, negativt medOscillospiraceae

lysoPA(0:0/18:0): negativt korreleret medLactobacillusogRomboutsia ilealis, positivt medNeglectibacter timonensis

Ureidoisosmørsyre: negativt korreleret medParaprevotella clara

16(R)-HETEog(2R,3R)-2-aminooctadecan-1,3-diol: positivt korreleret medNeglectibacter timonensis

Sphingosin: negativt korreleret medRomboutsia ilealis, positivt medNeglectibacter timonensis

lysoPA(18:0/0:0)ogRetinoyl-glucuronid: negativt korreleret medBifidobacterium animalisogRomboutsia ilealis(Figur 8)

Disse sammenhænge tyder påen stærk forbindelse mellem CBC-inducerede metabolomiske ændringer og tarmmikrobiotamodulering.

 

3.6 Regulering af SPHK1/S1P1/PI3K/Akt Pathway af CBC

Western blot-analyse viste detSPHK1- og S1P1-proteinekspressioner var signifikant forhøjet i modelgruppensammenlignet med normalgruppen. CBC (højdosis) betydeligtnedregulerede SPHK1- og S1P1-proteinniveauer. Der blev ikke observeret nogen signifikant forskel i SPHK2-ekspression blandt grupperne (figur 9, tabel 10).

DerudoverPI3K og Aktekspressionsniveauer blev signifikant reduceret i modelgruppen, mensp-PI3K og p-Aktniveauer var signifikant øget, hvilket indikerer pathway-aktivering. CBC behandlinggendannede PI3K og Akt niveaueroghæmmede deres fosforylering, hvilket reducererp-Akt/Akt og p-PI3K/PI3K forhold.

Disse resultater tyder på detCBC hæmmer SPHK1/S1P1/PI3K/Akt signalvejen, hvilket bidrager til dets anti-inflammatoriske virkning.

4. Diskussion

Kronisk ikke-bakteriel prostatitis (CNP) tegner sig for over90 % af alle prostatitisdiagnoserog er forbundet med en kompleks ætiologi, herunderpatogen mikrobiel infektion, oxidativt stress, immun dysregulering og autoimmune reaktioner [20–21].

Nylige beviser tyder på detinflammation og autoimmuniteter centrale for CNP-patogenesen [22-24]. Deeksperimentel autoimmun prostatitis (EAP) rottemodel, som efterligner human CNP i histopatologi og immunrespons, blev derfor valgt [25].

I vores tidligere serum farmakokemi undersøgelser blev CBC komponenter fundet ihøjere forekomst i afføring end i serum, underforståetintestinal interaktion som en primær handlingsvej(se CNKI Enhanced Publication Materials).

CBC forbedrer prostatapatologi og inflammatoriske indeks

HE-farvning viste, at CBC lindredelymfocytinfiltration, restaureretacinar strukturog stegkirtelsekret. CBC betydeligtreduceret leukocyttali prostata homogeniseres og genopretteslecithin kropsdensitet-begge nøgle CNP diagnostiske markører [26-28]. Inflammation fører til epitelbeskadigelse og reduceret lecithinsekretion, mens aktiverede makrofager opsluger lecithinlegemer [29]. CBC vendte effektivt disse patologiske ændringer.

CBC ogsåreducerede pro-inflammatoriske cytokiner(TNF-, IL-1, IL-6, IL-8, IL-2, iNOS) ogforhøjet antiinflammatorisk IL-10, der understøtter dens kraftige antiinflammatoriske virkning.

 

CBC regulerer tarmmikrobiota dysbiose

CNP er tæt knyttet tiltarmmikrobiota ubalance, som kan reducerekortkædede fedtsyrer (SCFA'er)og kompromittere tarmbarrieren, hvilket tilladerLPS-translokationog udløser prostatabetændelse viamikrobielle associerede molekylære mønstre (MAMP'er) [30].

Det viser undersøgelserCistanche polyfenolerforbedre mikrobiota ubalance og modulere vigtige taxa involveret iinflammatorisk tarmsygdom (IBD)[31]. I denne undersøgelse,Lactobacillus og Bifidobacterium animalisvar udtømte i EAP-rotter, men kom sig efter CBC-behandling. Disse probiotika er kendt for at lindre urogenital inflammation [32-33]. I modsætning hertilVeillonella, ofte beriget under autoimmune tilstande [34], var forhøjet i EAP-rotter og reduceret efter CBC-administration. TilsvarendePrevotellaceae, forbundet med prostatacancer [35], blev beriget i EAP-gruppen og reduceret med CBC.

 

CBC modulerer vigtige metaboliske veje

Metabolomics afsløretsphingosin forhøjelsei EAP-rotter, signifikant reduceret af CBC, hvilket tyder på involvering isphingolipid metabolisme. Sphingolipider er vigtige strukturelle og signalerende molekyler involveret icellevækst, apoptose og immunregulering [36].

Sphingosin-1-phosphat (S1P), syntetiseret afSPHK1/2, er en potent lipidmediator, der binder tilS1P-receptorer (S1PRs)til at regulere handel med immunceller og er impliceret iinflammatoriske og autoimmune sygdomme[37-39]. S1PR-modulatorenFTY720 (fingolimod)har vist sig at reducere inflammation og vævsskade i EAP-modeller [40].

S1P aktiverer også downstream pathways somPI3K/Akt, som er forbundet med kronisk inflammation. I vores undersøgelse, CBCnedreguleret SPHK1 og S1P1, og hæmmetPI3K og Akt fosforylering, hvilket tyder på en regulatorisk effekt på denne kritiske akse.

 

Konklusion

Denne undersøgelse, integreretarmmikrobiotasekventering og ikke-målrettet metabolomik, viser detCistanche-baserede kapsler (CBC)effektivt:

Forbedringbeskadigelse af prostatavæv

Undertrykkeinflammatoriske cytokiner

Gendangavnlig tarmflora

Reguleresphingolipid metabolisme

InhiberSPHK1/S1P1/PI3K/Akt signalering

Disse resultater giveroverbevisende beviserfor CBC's potentiale som enmulti-target urteterapi til kronisk ikke-bakteriel prostatitis, og tilbyder envidenskabeligt grundlag for dets udvidede kliniske anvendelse.