Kontakt: Audrey Hu Whatsapp/hp: 0086 13880143964 E-mail:audrey.hu@wecistanche.com

Antinociceptiv aktivitet af Cistanche salsa stoloner, der vokser i Republikken Kasakhstan

Elmira B. Kartbaevaa, et al

ABSTRAKT

HerbaCistanche(Cistanche arter) i traditionel kinesisk medicin bruges til behandling af flere sygdomme og symptomer, herunder smerter. Formålet med denne undersøgelse var at evaluere den antinociceptive virkning af hydroethanoliskuddrag afCistanchesalsa(CAMey.) Beck, Orobanchaceae, stoloner i dyremodeller af smerte. Den kemiske sammensætning afHerbaCistancheblev analyseret ved HPLC-UV. Mus Swiss Webster (25-30 g, n=6) blev oralt forbehandlet medHerbaCistanche(10, 30 eller 100 mg/kg) og vurderet i formalintesten og i den capsaicin- eller glutamat-inducerede slikkerespons. kasakhiskHerba Cistanchebestår hovedsageligt af phenylpropanoid glycosider, hvorfraechinacoside, akteosid, ogtubulosidB er hovedbestanddelene. HvornårHerbaCistancheblev administreret til mus, havde det en effekt i begge faser af formalintesten (77 procent aktivitet ved 30 mg/kg for fase 1 og 62 procent aktivitet ved 100 mg/kg for fase2), hvilket tyder på smertestillende og anti-inflammatoriske egenskaber. kasakhiskHerbaCistanchevar i stand til at reducere dyrenes slikketid efter injektion af glutamat (81 procent reduktion ved 30 mg/kg) og capsaicin (81 procent reduktion ved 100 mg/kg). Vi konkluderer, at phenoler til stede i det hydroethanoliske ekstrakt af C. salsa kunne være ansvarlige for dets farmakologiske profil. For at skaffe et råmateriale af god kvalitet til traditionel kinesisk medicin, anbefalede vi denne kasakhiske art at blive standardiseret ved hjælp afechinacoside og akteosidsom markører.

Nøgleord:Herba Cistanche,HPLC-UV,Echinacoside, Acteosid, Tubulosid, Standardisering

Introduktion

Cistanchesalsa(CA Mey) Beck, Orobanchaceae, er en parasitisk plante fra Republikken Kasakhstan, hvor den bruges som industrielt råmateriale (Sarsenbayev et al., 2011; Grudzinskaya og Gemedzhieva, 2012). Den videnskabelige værdi af denne urt i traditionel kinesisk medicin vedrører behandlingen af ​​nyreproblemer (varierende fra smerte til insufficiens), impotens, kvindelig infertilitet, sygelig leukorrhea, voldsom metrorrhagia og senil obstipation (Jiangsu New Medical College Dictionary of Traditional ChineseDrugs, 1977; kinesisk medicinalurte, 1988). Den kemiske sammensætning af stoloner af andre arter afCistancheer allerede blevet undersøgt i detaljer af kinesiske videnskabsmænd. Følgende phenolforbindelser blev identificeret:echinacoside, tubulosid, akteosid, udover lignaner, iridoider og et komplekst polysaccharid (Yong og Tu, 2009; Zhang et al., 2003; Xie et al., 2005; Jiang et al., 2009; Suiet al., 2011; Liu et al., 2013; Zhou et al., 2014).

Shimoda et al. (2009) viste, at denne urt har en hypokolesterolæmisk effekt, mens Yang et al. (2013) bestemte dens patoprotektive aktivitet. Nan et al. (2013) rapporterede den antiinflammatoriske aktivitet for dets ekstrakter. Et komplekst polysaccharid, der tidligere var isoleret fra denne plante, viste immunmodulerende virkninger (Wang et al., 2009).

Selvom der er en betydelig mængde afCistanchestoloner i Republikken Kasakhstan, er der ingen populær brug for denne plante af den kasakhiske befolkning, selvom naboerne i Kina i vid udstrækning bruger den. På grund af det faktum, at der i dag er et betydeligt problem i forhold til substitution/forfalskning af lægeplanter og det stigende behov for at standardisere medicin til brug i traditionel kinesisk medicin, blev denne undersøgelse designet til at fastslå den phenoliske kemiske sammensætning af dette rå plantemateriale, der vokser i nabolandet Kasakhstan samt at vurdere dets brug som antinociceptivt for potentielt at lindre smerten - hvilket karakteriserer en af ​​dets hovedanvendelse i traditionel kinesisk medicin.

Materialer og metoder

Plantemateriale

Cistanchesalsa (CAMey.) Beck, Orobanchaceae, stoloner blev indsamlet i ørkenen Moinkum, landsbyen Bakanas, i juli 2014 i Almaty. Plantematerialet blev identificeret af Dr. G. Sitpayeva fra Institute of Botany and Phytointroduction, Ministeriet for Uddannelse og Videnskab i Republikken Kasakhstan, hvor det blev deponeret under nummeret 01-04/306.

Kemisk analyse

Stoloner af C. salsa (2 g) blev underkastet en mikrobølgeekstraktion. Til at begynde med blev materialet malet til 0.001-2.000 mm og derefter anbragt i en hermetisk beholder for at blive ekstraheret i 10 min. ved 100-1100 ◦C med ethanol 80 procent (forhold 1:10). Hydroethanolekstrakten (CSHE) blev analyseret ved HPLC-MS. Den rå ekstrakt blev opløst i methanol (9,6 mg/ml) og filtreret gennem en 0,45 mm Teflon-membran før analysen. En væskekromatograf HP 1100 Series-model (firma Agilent Technologies, Inc., CA, USA), udstyret med en flydende vakuumafgasser, en fire-kanals lavtryksgradientpumpe og en automatisk injektor. Phenolforbindelser blev chromatografisk adskilt af en søjleZorbax Eclipse XDB-C18, 2,1 x 50 mm, fyldt med octadecylsilyl silicagelpolymer (1,8 µm). Kromatografisk analyse blev udført med et mobilfaseflow på 0,2 ml/min, eluentdriftstryk på 175-200 kPa, kolonneovnstemperatur på 30 ◦C, 2 ml prøvevolumen, gradient-eluenttilførselstilstand: 0-36 min. 10 procent A – 90 procent B;36 min – 100 procent B (eluent A: methanol, eluent B: 0,2 procent myresyreopløsning). Detektion blev udført med UV ved bølgelængderne på 254, 334, 350, 410, 450 og 550 nm. Sammenligning af de opnåede retentionstider, UV- og massespektre med referenceforbindelserne blev anvendt til identifikation af de kemiske forbindelser i ekstraktet. Kvantitativ analyse blev udført ved brug af standardverbascosideogechinacosideanalyseret under de samme kromatografiske betingelser. Deres kalibreringskurver gjorde det muligt at beregne mængden af ​​hinandens phenylpropanoidglycosid i ethanolekstraktet af denne plante. Metoden blev ikke valideret.

Dyr

Swiss Webster-mus (20-25 g, to måneder gamle) blev brugt i denne undersøgelse (doneret af Instituto Vital Brazil, Niterói, RJ, Brasilien). Dyrene blev holdt under standardforhold (lys-mørke cyklus på 12 timer, 22 ± 2 grader og 70-80 procent luftfugtighed. Mad og vand ad libitum). Dyr modtog kun vand for at undgå fødeinterferens med stofabsorption 12 timer før forsøgets begyndelse. Akklimatisering til laboratorieforholdene skete i mindst 1 time før hver test. Alle protokoller blev udført i overensstemmelse med retningslinjerne for etiske standarder for undersøgelse af eksperimentel smerte hos dyr og fulgte principperne og retningslinjerne vedtaget af National Council for Control of Animal Experimentation (CONCEA), godkendt af Biomedical Science Institute/UFRJ, Ethical Committee for Animal Research, og modtog nummeret DFBCICB015-04/16. Alle eksperimentelle protokoller blev udført under den lette fase. Antallet af dyr pr. gruppe blev holdt på et minimum og i henhold til regler fra CONCEA. Ved afslutningen af ​​hvert eksperiment blev mus dræbt af ketamin/xylazin-overdosis.

Behandlinger

I denne undersøgelse blev CSHE vurderet til 10, 30 og 100 mg/kg. Ekstraktet blev opløst i dimethylsulfoxid (DMSO, FisherBiotech) for at fremstille en stamopløsning på 100 mg/ml. PBS blev brugt som fortyndingsmiddel til fremstilling af de forskellige doser. Opløsninger indeholdende 10, 30 og 100 mg/kg af hydroethanolekstrakten afCistanchesalsablev forberedt. De anvendte standardlægemidler var morfin 2,5 mg/kg (Merck, fortyndet i phosphatbuffer saltvand (PBS)), acetylsalicylsyre 200 mg/kg (Sigma Aldrich, opløst med 5 M natriumhydroxid (NaOH) i 0,9 procent saltvand) og capsazepin 10 nMolper pote. Saltvand plus DMSO (i samme koncentration som i den højeste behandling med ekstrakt) blev givet til den negative kontrolgruppe. Alle behandlinger (testet ekstrakt og standarder) blev administreret oralt. Den eneste undtagelse var capsazepin, som blev administreret ved intraplantar injektion.

Formalin-induceret akut smerte

En opløsning af 2,5 procent formalin (37 procent formaldehyd) blev injiceret (20 µl) i plantarområdet på højre bagpote på mus 60 minutter efter behandling (hydroethanolekstrakt afCistanchesalsaeller acetylsalicylsyre 200 mg/kg eller morfin 2,5 mg/kg) (Matheus et al., 2005). Dyrene blev individuelt placeret i et gennemsigtigt glaskammer, og varigheden af ​​den tid i sekunder, de brugte på at slikke deres pawafter-injektion af formalin, blev registreret og analyseret over to separate perioder, tidlig fase-neurogen smerte (0-5 minutter efter injektion) og sen fase- inflammatoriske smerter (15-30 min efter injektion).

Nociception induceret af capsaicin

Denne test var baseret på metoden beskrevet af Sakurada et al. med nogle modifikationer (Sakurada et al., 1992). Capsaicin (20 ul)C18H27NO3 (Galena, Campinas, SP) blev injiceret i plantarregionen af ​​musenes højre bagpote (1,6 ug/pote) en time efter behandling (hydroethanolekstrakt afCistanchesalsa eller capsazepin10 nMol/pote). Dyrene blev individuelt anbragt i et glaskammer, og varigheden af ​​poteslikken blev registreret mellem 0 og 5 minutter efter capsaicin-injektionen og derefter analyseret.

Glutamat-induceret nociception

I metoden beskrevet af Beirith et al. (2002) blev glutamatopløsning i PBS (20 ul)(l-glutaminsyre, Sigma-Aldrich, 3,7 ng/pote) injiceret i plantarområdet på højre bagpote på musene en time efter behandling (hydroethanolekstrakt afCistanchesalsa eller morfin 2,5 mg/kg). Dyrene blev anbragt individuelt i et glaskammer, og varigheden af ​​poteslikning (sekunder) blev registreret mellem 0 og 15 minutter efter glutamatinjektionen og derefter analyseret.

Statistisk analyse

De kemiske data er præsenteret som gennemsnit ± SD af fem eksperimenter. Alle farmakologiske forsøgsgrupper bestod af mindst seks mus. Analyse af envejsvarians (ANOVA) efterfulgt af Dunnetts test muliggjorde visualisering af statistisk signifikans mellem grupper ved hjælp af GraphPad Prism 5.0-software. p-værdier blev betragtet som signifikante, når de var mindre end 0.05(p <>

Resultater

Cistanchesalsa hydroethanolekstrakt (to forskellige fortyndinger) kromatogram er vist i fig. 1. Tabel 1 viser bestemmelsen af ​​phenolforbindelserne sammen med deres respektive retentionstider i kromatogrammet.

Effekt af CSHE på formalin-induceret akut smerte

I den formalin-inducerede akutte smertetest var CSHE ved 10, 30 og 100 mg/kg i stand til at mindske poteslikning i den første fase af testen kendt som den neurogene smertefase, disse reduktioner var henholdsvis 60, 77 og 58 procent. . Derudover var de også effektive til at reducere inflammatoriske smerter induceret under den anden fase af testen, den procentvise hæmning af inflammatorisk smerte var henholdsvis 42, 46 og 62 procent (fig. 2). Morfin (2,5 mg/kg) og acetylsalicylsyre (200 mg/kg) gav følgende resultater: 55 procent /33 procent og 31 procent /54 procent for henholdsvis første og anden fase.

Effekt af CSHE på glutamat-induceret nociception

CSHE reducerede slikningen induceret af glutamat ved de tre testede doser, 10, 30 og 100 mg/kg med henholdsvis 76, 81 og 53 procent (fig. 3). Morfin på 2,5 procent resulterede i en reduktion på 76 procent

Effekt af CSHE på capsaicin-induceret nociception

For at verificere, om CSHE ville påvirke nociception gennem TRPV1-receptorer, blev den testet i en model af smerte induceret af capsaicin. Den antinociceptive effekt gennem denne model blev observeret for CSHE i de tre testede doser med henholdsvis 76, 79 og 81 procent (fig. 4). Capsazepin 10 nMol/pote resulterede i en reduktion på 60 procent.

Diskussion

I alt ti phenylpropanoid glucosider blev identificeret i C. salsa (vokser i Kasakhstan) hydroethanolekstrakt.Echinacoside(10,98 mg/g),akteosid(9,44 mg/g) og tubulosid B (7,94 mg/g) var de vigtigste identificerede forbindelser. De opnåede data var korreleret med den tilgængelige litteratur for arter afCistanchevokser i forskellige regioner i Asien (Zhou et al., 2014; Xieet al., 2005; Jiang et al., 2009).Echinacosideogakteosider hovedkomponenterne, som danner grundlag for standardisering af de officielle arterCistanchedeserticola ogCistanchetubulosa, opført i den kinesiske farmakopé i 2005. Vi foreslår, at disse forbindelser også kan bruges til standardisering afCistanchesalsa stoloner fra Kasakhstan, da de er de vigtigste i den undersøgte hydroethanolekstrakt.

Ifølge de farmakologiske resultater af denne undersøgelse er det muligt at antyde, at CSHE er et effektivt middel mod neurogen smerte og inflammation som observeret i formalintesten. Så vidt vi ved,Cistanchesalsa er aldrig blevet testet i forhold til dets antinociceptive virkninger. En undersøgelse fra 2002 medCistanchedeserticola (Lin et al., 2002) har vist, at denne plante udviste antinociceptive og antiinflammatoriske aktiviteter, når den blev analyseret i modeller såsom total vridning, formalin og poteødem. Selvom der ikke var noget forsøg på at undersøge hovedbestanddelene i ekstrakterne, der var aktive, anså de butanolekstraktet og vandlaget som de aktive. Ikke overraskende er disse opløsningsmidler i den polaritetsskala, der matcher de phenylpropanoidglycosider, der findes iCistanchesalsa. Desuden fastslog Lin og kolleger, at den antinociceptive virkning afCistanchedeserticola-ekstrakter skyldtes ikke virkningen af ​​forbindelsen i opiatreceptoren eller relateret til immunsystemet. I vores undersøgelse viste det phenylpropanoidrige ekstrakt aktivitet i begge faser af formalintesten. Den observerede aktivitet skyldtes faktisk det undersøgte farmakologiske mål og ikke nogen mulig motorisk ændring som påvist af therotarod-testen. Formalin testresultater indikerer potentialet for neurogen smerte såvel som smerte induceret af inflammatoriske mediatorer. I første omgang besluttede vi at undersøge den neurogene smertevej. Fordi lignende forbindelser fra andre arter tidligere undersøgt ikke viste nogen opiatreceptoraktivitet, besluttede vi at teste andre modeller, såsom glutamat- og capsaicin-modeller.

Glutamat er en excitatorisk neurotransmitter, der har en vigtig rolle i at modulere smerte i hele det perifere og centralnervesystem. Denne virkning medieres af ligand-gatede ionotropiske glutamatreceptorer (iGluR'er) og metabotrope glutamatreceptorer. iGluR'erne kan opdeles i N-methyl-d-aspartat(NMDA) og -amino-3-hydroxy-5-methylisoxazol-4-propionsyre (AMPA) (Kolber, 2015). Forskning har vist, at når man antagoniserer NMDA- og AMPA-receptorer med henholdsvis ketamin og kainat, observeres antinociceptionseffekter. Imidlertid har antagonister rettet mod disse receptorer indtil videre induceret en væsentlig negativ virkning, og af denne grund fokuserer ny forskning på mGluRshoping, at medicin medieret gennem denne receptor ville forårsage færre bivirkninger (Palazzo et al., 2014). Resultaterne af test af CSHE viste, at denne behandling var effektiv til at reducere smerte induceret af glutamat. Det er dog stadig ukendt, om denne effekt er medieret gennem ionotrope og/eller metabotrope receptorer. Morfin er et af de tilgængelige lægemidler, der har en effekt på glutamaterg transmission (Deyama et al., 2007). Det er rapporteret i litteraturen, at glutamatreceptoraktivering øger TRPV1-responser (Szteyn et al., 2015). Af den grund er det muligt, at effekten observeret for CSHE kan skyldes aktivitet på TRPV1 og ikke nødvendigvis gennem et direkte respons på glutamatreceptorer.

Det næste trin i denne forskning var at udføre en poteslikkende test med capsaicin som det algetiske middel, som er en TRPV1-receptoragonist. Resultaterne viste, at CSHE faktisk mindskede smerte gennem TRPV1-receptoren.

I tilfælde af CSHE kunne vi næsten i alle de testede metoder observere, at dosen på 30 mg/kg gav bedre resultater end 100 mg/kg. Dette kan skyldes, at opløsningens mætning fører til udfældede forbindelser, og at mindre mængder af lægemidler effektivt er biotilgængelige.

Bekræftelse af den etablerede kemiske sammensætning for det kasakhiske ekstrakt CSHE var et vigtigt skridt, fordi de vigtigste bestanddele, der er til stede i det, allerede på en eller anden måde har fået bekræftet deres antinociceptive/antiinflammatoriske virkninger.echinacosideblev etableret som et af de aktive principper, der er ansvarlige for den antinociceptive virkning af Echinacea (Hostettmann, 2003). Også en tidligere undersøgelse af Schapoval og kolleger (Schapoval et al., 1998) påpegedeakteosidsom et af de vigtigste aktive principper i et ethanolekstrakt fremstillet med Stachytarpheta cayennensis som vurderet ved poteødem og varmeplademodeller. Backhouse og medarbejdere (Backhouse et al., 2008) vurderede ogsåakteosidat være det aktive princip i Buddleja globos ved at bruge adskillige modeller for smertevurdering, herunder formalintest. Nye formuleringer udvikles nu ved at bruge den nyeste viden til at øge stabiliteten og forlænge den antinociceptive virkning afakteosid(Isacchi et al., 2016).

Konklusion

Ti stoffer af phenolisk natur blev identificeret i stolons af kasakherneCistanchesalsa ved HPLC/MS-analyse. Disse forbindelser kunne være ansvarlige for den antinociceptive aktivitet observeret i de eksperimentelle modeller udført heri. Under hensyntagen til, at slægten på Kasakhstans territoriumCistancheer primært repræsenteret af arterCistanchesalsa, kan vi anbefale dens høst og standardisering ved hjælp afechinacosideogakteosidsom standardforbindelser for at finde et råmateriale af god kvalitet til traditionel kinesisk medicin.

Etiske afsløringer

Beskyttelse af mennesker og dyr. Forfatterne erklærer, at de fulgte procedurer var i overensstemmelse med reglerne fra den relevante kliniske forskningsetiske komité og med reglerne i World Medical Associations etiske kodeks (Declaration of Helsinki).

Fortrolighed af data.

Forfatterne erklærer, at ingen patientdata optræder i denne artikel.

Ret til privatliv og informeret samtykke. Forfatterne erklærer, at ingen patientdata vises i denne artikel.

Forfatteres bidrag

EBK udførte indsamling af anlægget, forberedelse af ekstrakten og analyse af de kemiske resultater samt skrivning af papiret; GRD, udførte alle de farmakologiske tests; ZBS, designede undersøgelsen i samarbejde med FB; LNI og ENB, deltog i det farmakopéielle design af undersøgelsen med henblik på at inkludere de opnåede resultater i den kasakhiske farmakopé; IIT, udførte HPLC-analyserne; PDF, designet den farmakologiske undersøgelse og FB, organiserede holdet sammen for at skrive dette papir.

Interessekonflikt

Forfatterne erklærer ingen interessekonflikter.

Anerkendelser

Forfatterne fra Brasilien takker hr. Alan Minho for teknisk bistand og Instituto Vital Brazil for donationer af brugte dyr. De ønsker også at anerkende bevillingerne fra CNPq og Fundac¸ ão Carlos Chagas Filho de Apoio à Pesquisa do Estadodo Rio de Janeiro. Forfatterne fra Irland ønsker at anerkende High Education Authority's Program for Research in Third-Level Institutions Cycle 5's støtte til TBSI og at forstærke vigtigheden af ​​SFI-programmet ISCA-Brazil (tilskudsnr. SFI/13/ISCA/2843), der bidrog til samarbejde mellem Brasilien og Irland. Forfatterne fra Kasakhstan ønsker at anerkende KazNMU for den økonomiske støtte, der er tilladt til udførelsen af ​​dette arbejde.

Fra: 'Antinociceptiv aktivitet af Cistanche salsa stoloner, der vokser i Republikken Kasakhstan' af Elmira B. Kartbaevaa, et al.

---EB Kartbaeva et al. / Revista Brasileira de Farmacognosia 27 (2017) 587–591

Referencer

Backhouse, N., Delporte, C., Apablaza, C., Farias, M., Goïty, L., Arrau, S., Negrete, R., Castro, C., Miranda, H., 2008. Antinociceptiv aktivitet af Buddleja globose (matico) i flere modeller af smerte. J. Ethnopharmacol. 119, 160-165.

Beirith, A., Santos, ARS, Calixto, JB, 2002. Mekanismer, der ligger til grund for nociception og poteødem forårsaget af injektion af glutamat i musepoten. Brain Res. 924, 219-228.

Chinese Academy of Medical Sciences, 1988. Institute of Medicinal Plants, Chinese Medicinal Herbal, vol. 4., 2. udg. People's Medical Publishing House, Beijing.

Deyama, S., Yamamoto, J., Machida, T., Tanimoto, S., Nakagawa, AT, Kaneko, S., Satoh, M., Minami, M., 2007. Hæmning af glutamaterg transmission af morfin i basolateralen amygdaloid nucleus reducerer smerte-induceret aversion. Neurosci. Res. 59, 199-204.

Grudzinskaya, LM, Gemedzhieva, NG, 2012. Liste over lægeplanter i Kasakhstan. Publishing House of Institute of Botany and Phytointroduction of the RK, Almaty.
Hostettmann, K., 2003. En plantes historie: eksemplet med Echinacea. Forsch Komp. Klas. Nat. Suppl. 1, 9-12.
Isacchi, B., Bergonzi, MC, Iacopi, R., Ghelardini, C., Galeotti, N., Bilia, AR, 2016.
Liposomal formulering for at øge stabiliteten og forlænge anti-neuropatisk aktivitet af verbascoside. Planta Med. 83, 412-419.
Jiang, Y., Li, SP, Wang, YT, Chen, XJ, Tu, PF, 2009. Differentiering afHerbaCistancherved fingeraftryk med højtydende væskekromatografi-diode array detektion-massespektrometri. J. Chromatogr. 1216, 2156-2162.
Jiangsu New Medical College Dictionary of Traditional Chinese Drugs, 1977. 1. udg., Shanghai Scientific & Technologic Publisher, Shanghai.
Kolber, BJ, 2015. mGluRs top til tå i smerte. Prog. Mol. Biol. Overs. 131, 281-324.
Lin, LW, Hsieh, MT, Tsai, FH, Wang, WH, Wu, CR, 2002. Anti-nociceptiv og anti-inflammatorisk aktivitet forårsaget af Cistanche deserticola hos gnavere. J. Ethnopharmacol. 83, 177-182.
Liu, XM, Li, J., Jiang, Y., Zhao, MB, Tu, PF, 2013. Kemiske bestanddele fra Cistanche Sinensis (Orobanchaceae). Biochem. Syst. Ecol. 47, 21-24.
Matheus, ME, Berrondo, LF, Vieitas, EC, Menezes, FS, Fernandes, PD, 2005. Evaluering af de antinociceptive egenskaber fra Brillantaisia ​​palisotii Lindau stammeekstrakter. J. Ethnopharmacol. 102, 377-381.
Nan, ZD, Zeng, KW, Shi, SP, Zhao, MB, Jiang, Y., Tu, PF, 2013. Phenylethanoidglykosider med antiinflammatoriske aktiviteter fra stænglerne af Cistanche deserticola dyrket i Tarim-ørkenen. Fitoterapia 89, 167-174.
Palazzo, E., Marabese, I., de Novellis, V., Rossi, F., Maione, S., 2014. Supraspinal metabotropiske glutamatreceptorer: et mål for smertelindring og videre. Eur. J. Neurosci. 39, 444-454.
Sakurada, T., Katsumata, K., Tanno, K., Sakurada, S., Kisara, K., 1992. Capsaicin-testen i mus til evaluering af tachykinin-antagonister i rygmarven. Neuropharmacology 31, 1279-1285.
Sarsenbayev, KN, Isabaev, SO, Kolosov, NG, 2011. Proceedings of the International Scientific Conference "Modern Ecological State of the Aral Sea Region, the Prospects for Solving Problems'', Kyzylorda, pp. 195-200.
Schapoval, EES, Vargas, MRW, Chaves, CG, Bridi, R., Zuanazzi, JA, Henriques, AT, 1998. Antiinflammatoriske og antinociceptive aktiviteter af ekstrakter og isolerede forbindelser fra Stachytarpheta cayennensis. J. Ethnopharmacol. 60, 53-59.
Shimoda, H., Tanaka, J., Takahara, Y., Takemoto, K., Shan, SJ, Su, MH, 2009. De hypokolesterolæmiske virkninger af Cistanche tubulosa-ekstrakt, en kinesisk traditionel råmedicin, hos mus. Er. J. Chin. Med. 37, 1125-1138.
Sui, ZF, Gu, TM, Liu, B., Peng, SW, Zhao, ZL, Le, L., Shi, DF, Yang, RY, 2011. Vandopløselig kulhydratforbindelse fra legemer afHerbaCistanche: isolering og dets rensende effekt på frie radikaler i huden. Kulhydrat. Polym. 85, 75-79.
Szteyn, K., Rowen, MP, Gomez, R., Du, J., Carlton, SM, Jeske, NA, 2015. A-kinase-forankringsprotein 79/150 koordinerer metabotropisk glutamatreceptor-sensibilisering af perifere sensoriske neuroner. Smerte 156, 2364-2372.
Wang, XY, Qi, Y., Cai, RL, Li, XH, Yang, MH, Shi, Y., 2009. Effekten af ​​Cistanche deserticola polysaccharides (CDPS) på makrofager aktivering. Hage. Pharmacol. Tyr. 25, 787-789.
Xie, JN, Zhao, MB, Wu, FW, Tu, PF, 2005. Det kromatografiske fingeraftryk af Cistanche deserticola ved HPLC. Hage. Trad. Urt. Drugs 36, 268-271.
Yang, FR, Wen, DS, Fang, BW, Lou, JS, Meng, L., 2013. Forebyggelse af Cistanche salsa-ekstrakt på hepatisk fibrose induceret af kulstoftetrachlorid i rotter. Hage. Urt. Med. 5, 199-204.
Yong, J., Tu, PF, 2009. Analyse af kemiske bestanddele i Cistanche-arter. J. Chromatogr. 1216, 1970-1979.
Zhang, X., Li, X., Rena, K., Du, NS, 2003. RP-HPLC-bestemmelse af echinacosid ogakteosidiHerbaCistancherdyrket på forskellige parasitære arter og levesteder. Hage. J. Pharm. Anal. 23, 254-256.
Zhou, J., Zhang, Q., Bing Sun, J., Li Sun, X., Zeng, P., 2014. Tofaset hulfiber væskefasemikroekstraktion baseret på magnetofluid til samtidig bestemmelse afechinacoside, tubulosid B, akteosidog isoacteosid i rotteplasma efter oral administration af Cistanche salsaekstrakt ved højtydende væskekromatografi. J. Pharm. Biomed. Anal. 94, 30-35.