Analyse af antistofneutraliseringsaktivitet mod SARS-CoV-2-varianter og sæsonbestemte humane Coronaviruss NL63, HKU1 og 229E induceret af tre forskellige COVID-19-vaccineplatforme

Abstrakt: Coronavirus-infektioner, der kulminerede med den nylige pandemi med alvorligt akut respiratorisk syndrom coronavirus 2 (SARS-CoV-2), der begyndte i 2019, har fremhævet vigtigheden af ​​effektive vacciner til at inducere et antistofrespons med krydsneutraliserende aktivitet. COVID-19-vacciner er hurtigt blevet udviklet for at reducere byrden af ​​SARS-CoV-2-infektioner og sygdommens sværhedsgrad. Krydsbeskyttelse mod sæsonbetingede humane coronavirus (hCoV)-infektioner er blevet antaget, men er stadig kontroversiel. Her undersøgte vi den neutraliserende aktivitet mod forfædres SARS-CoV-2 og varianter af bekymring (VOC'er) hos individer vaccineret med to doser af enten BNT162b2, mRNA-1273 eller AZD1222, med eller uden en historie af SARS-CoV-2-infektion. Antistofneutraliserende aktivitet mod SARS-CoV-2 og VOC'erne var højere hos BNT162b2-vaccinerede forsøgspersoner, som tidligere var inficeret med SARS-CoV-2 og gav bredspektret beskyttelse. Omicron BA.1-varianten var den mest modstandsdygtige blandt VOC'erne. COVID-19-vaccination gav ikke beskyttelse mod hCoV-HKU1. Omvendt udviste antistoffer induceret af mRNA-1273-vaccination et boost i deres neutraliserende aktivitet mod hCoV-NL63, hvorimod AZD1222-vaccination øgede antistofneutralisering mod hCoV-229E, hvilket tyder på potentielle forskelle i antigenicitet og immunogenicitet af de forskellige spikes konstruktioner brugt mellem forskellige vaccinationsplatforme. Disse data tyder på, at der kan være delte epitoper mellem HCoV'erne og SARS-CoV-2 spike-proteinerne.

Nøgleord: SARS-CoV-2; sæson; HKU1; 229E; NL63; neutralisering

cistanche tubulosa-forbedrer immunsystemet

1. Introduktion

I december 2019 spredte udbruddet af en ny coronavirus ved navn alvorligt akut respiratorisk syndrom coronavirus 2 (SARS-CoV-2) sig hurtigt over hele verden, hvilket resulterede i en global pandemi [1]. Siden da har internationale bestræbelser på at skabe et passende lægemiddel resulteret i udviklingen af ​​flere vaccinationsplatforme og andre antivirale lægemidler. Den gradvise stigning af varianter har haft en reduceret indvirkning på effektiviteten af ​​neutraliserende antistoffer, der er rejst enten ved tidligere infektion med SARS-CoV-2 eller ved vaccination [2,3]. Verdenssundhedsorganisationen (WHO) har kategoriseret de bekymrende varianter som varianter af bekymring (VOC), hvorimod andre varianter, der ikke opfylder de samme kriterier, falder ind under varianter af interesse (VOI) eller varianter under undersøgelse (VUI). Der har været en betydelig mængde fokus på varianter og deres karakteristika, såsom antistofunddragelse og replikationshastigheder, med mange undersøgelser, der sammenligner varianter og deres evne til at blive neutraliseret [4-8], efterhånden som pandemien fortsætter med at udvikle sig.

cistanche tubulosa-forbedrer immunsystemet

SARS-CoV-2 tilhører Coronaviridae-familien, der omfatter SARS-CoV-1 [9], mellemøstlig respiratorisk virus (MERS) [10] og fire humane coronavirusser 229E, HKU-1 , NL63 og OC43 [11] (figur 1A). Mens SARS-CoV-1 og MERS har haft udbrud, der forårsagede alvorlig sygdom hos mennesker [12], forårsager de fire andre coronavirusser, almindeligvis omtalt som sæsonbestemte eller humane coronavirusser (HCoV'er), typisk mild sygdom, der ligner en almindelig forkølelse [11,13]. I sjældne tilfælde kan HCoV'erne dog forårsage alvorlige sygdomme [14-16]. SARS-CoV-2 bruger sammen med NL63 angiotensin-konverterende enzym 2 (ACE2) som sin vigtigste celleindgangsreceptor [17,18]. På trods af at HKU1 og OC43 er tættere beslægtet med SARS-CoV-2, binder de sig til sialinsyrer som en indgangsmåde [19], mens mere fjernt beslægtede 229E bruger human aminopeptidase (hAPN) [20]. (Figur 1B).

Figur 1. Fylogenetisk træ for medlemmerne i Coronaviridae-familien. * betegner spidsproteiner, der blev brugt i denne undersøgelse (A). Strukturer af spidsproteiner af SARS-CoV-2 og tre af sæsonbestemte HCoV'er; HKU1, NL63 og 229E, som blev brugt i denne undersøgelse (B). (PDB-koder: 6VXX, 60HW, 6U7H, 5I08 og 5SZS). Grå angiver S2-domænet, hvorimod lyseblåt er det N-terminale domæne af S1-underenheden, og mørkeblåt repræsenterer den resterende S1-underenhed. NL63 har en ekstra blågrøn sektion, der repræsenterer en unik region i S1-domænet, der ikke observeres i andre coronavirus [21].

I begyndelsen af ​​pandemien var der en debat om muligheden for, at antistoffer rejst mod HCOV'erne havde nogen rolle i beskyttelsen mod SARS-CoV-2 [22-25]. Siden da har stigende interesse for HCoV'er ført til en øget forståelse af det immunrespons, de genererer. Adskillige publikationer, der undersøgte virkningen af ​​HCoV'er, var afhængige af brugen af ​​bindingsassays såsom enzym-linked immunosorbent assays (ELISA), der måler antistofbinding, men som ikke belyste deres neutraliserende evner. Desuden er den succesrige generation af forskellige vaccineplatforme blevet brugt til at beskytte individer mod infektion og alvorlig sygdom [26], selvom deres effektivitet formindskes efterhånden som nyere og mere immunundvigende varianter opstår [27]. Her bruger vi lentiviral-baserede pseudotypevira af SARS-CoV-2, VOC'erne/VOI og HCoV'erne til at måle styrken af ​​neutraliserende antistoffer induceret af to doser af enten BNT162b2 (Pfizer), AZD1222 (Astrazeneca), eller mRNA-1273 (Moderna) mod SARS-CoV-2 og varianter B.1.1.7 (Alfa), B.1.351 (Beta), P.1 (Gamma), B.1.617.2 ( Delta), B.1.525 (Eta) og B.1.1.529 (Omicron BA.1) (figur 2), og om nogen af ​​disse vacciner er i stand til at forstærke neutraliserende antistoffer mod HCoVs 229E, HKU1 eller NL63.

Figur 2. SARS-CoV-2-varianter spidsmutationer brugt i denne undersøgelse.

2. Materialer og metoder

2.1. Patientserumindsamling/etisk information

Seraprøver blev indsamlet fra 36 raske vaccinerede forsøgspersoner. Undersøgelsen blev godkendt af San Raffaele Scientific Hospital Ethical Committee (protokolnummer 68/INT/2020). Alle tilmeldte patienter gav skriftligt informeret samtykke.

2.2. Fylogenetisk træ og lighedsplot

En fylogenetisk rekonstruktion med maksimal sandsynlighed baseret på spike-genkodonjusteringen blev konstrueret ved hjælp af et træ (version 1.6.12) [28] med 10,000 ultrahurtige bootstrap-replikater [29] og en TVM+F+I +G4 substitutionsmodel, valgt ved hjælp af ModelFinder [30]. Sekvenslighedsplottet blev konstrueret ved at justere spikeproteinsekvenser af SARS CoV-2 (QHD43416.1), HKU1 (YP_173238.1) 229E (NP_073551.1) og NL63 ( YP_003767.1), ved hjælp af mat (version 7.453) [31] (genparmulighed) og visualiseret ved hjælp af D3 JavaScript-pakken implementeret i observable (https://observablehq.com/@spyros-lytras/seasonal cov -spike tilgået den 3. november 2022).

2.3. Vævskultur

Humane embryonale nyre 293T/17 (HEK293T/17) celler og humane hepatocytter Huh- 7 celler blev opretholdt i DMEM suppleret med 10 % føtalt bovint serum og 1 % penicillin/streptomycin. Kinesiske ovariehamsterceller (CHO) blev opretholdt i Ham's F12 suppleret med 10% føtalt bovint serum og 1% penicillin/streptomycin. Celler blev rutinemæssigt passeret for at forhindre konfluens ved at vaske med phosphatpufret saltvandsopløsning og løsnes med trypsin-EDTA. Alle celler blev inkuberet ved 37 ◦C og 5% CO2.

cistanche planteforøgende immunsystem

2.4. Pseudotype virusproduktion

Alle pseudotyper (PV'er) blev genereret som tidligere beskrevet [32]. Kort fortalt, 1000 ng pc-DNA 3.1+-plasmid, der bærer spidsen af ​​forfædres SARS-CoV-2, varianter Alpha, Beta, Delta, Gamma, Eta, Omicron Ba. 1, eller HCoVs 229E, HKU1 og NL63 blev blandet med 1000 ng p8.91 plasmid kodende for HIV Gag-pol og 1500 ng pCSFLW plasmid indeholdende Renilla firefly luciferase reportergenet og co-transficeret til HEK293T cellekonfluens. i T-75-kolber ved hjælp af FuGENE-HD. HKU-1 krævede et yderligere trin med tilsætning af 1,5 U eksogen neuraminidase (Sigma) i 10 ml genopfyldt DMEM 24 timer efter transfektion. For at høste de pseudotypede vira blev mediet aspireret 48 timer efter en dag med transfektion og filtreret ved anvendelse af et 0,45 µm celluloseacetatfilter. Alle PV'er blev alikvoteret og opbevaret ved -80 ◦C til opbevaring. Efter gentagne forsøg var vi ikke i stand til at pseudotype HCoV OC43.

2.5. Pseudotype virustitrering

Alle PV'er blev titreret som tidligere beskrevet [32]. Målceller for SARS-CoV-2, varianter og HCoV NL63 blev forberedt dagen før titrering ved at transficere ACE-2 og TRSSMP2. CHO-celler blev brugt som målceller for HKU-1, og Huh-7-celler blev brugt som målceller for 229E. Kort fortalt blev 50 µL høstet PV tilsat i den øverste række af en hvid F-bund 96-brøndplade (Nunc) og seriefortyndet med DMEM eller Ham's F-12 for HKU-1 PV'er i halve trin til den nederste række af pladen før tilføjelse af 10,000 målceller i hver brønd. Plader blev returneret til inkubatoren i 48 timer før lysering med Bright-Glo-reagens og analyse af luciferase-reportergenaktivitet i relative linieenheder (RLU) ved anvendelse af et Glo-Max-luminometer. PV-titere er rapporteret i RLU/ml.

cistanche tubulosa-forbedrer immunsystemet

Klik her for at se produkter fra Cistanche Enhance Immunity

【Spørg om mere】 E-mail:cindy.xue@wecistanche.com / Whats App: 0086 18599088692 / Wechat: 18599088692

2.6. Pseudotype mikroneutralisering (pMN) assays

pMN-assayet blev udført som tidligere beskrevet. Kort fortalt blev rekonvalescerende sera blandet med enten DMEM eller Ham's F-12 ved en indledende 1:40-fortynding og derefter seriefortyndet 2-fold i en hvid fladbundet 96-brøndplade til en endelig fortynding på 1:5120. Alle prøver blev gentaget i to eksemplarer. PV'er blev derefter tilsat til hver brønd ved et input på 1 × 106 RLU/mL. Pladerne blev returneret til vævskulturinkubatoren i 1 time før tilsætning af præ-transficerede ACE-2/TRSSMP2 HEK293T-målceller eller CHO-celler for HKU-1- og Huh-7-celler for 229E, ved en tæthed på 1 × 104 celler pr. brønd. Plader blev returneret til inkubatoren i 48 timer før lysering med Bright-Glo-reagens og analyse af luciferase-reportergenaktivitet i relative linieenheder (RLU) ved anvendelse af et Glo-Max-luminometer. IC50'er blev beregnet ved hjælp af GraphPad Prism 8-software ved hjælp af en ikke-lineær regressionskurve som beskrevet i [33].

2.7. Statistisk analyse

Wilcoxon matchede par-rangerede test blev brugt til at vurdere betydningen af ​​matchede forsøgspersoner. Kruskal–Wallis ANOVA-test blev brugt til at vurdere signifikans ved sammenligning af IC50-titre mellem tre vaccineplatforme. Alle test blev brugt på GraphPad Prism 8 software.

3. Resultater

3.1. Kohortekarakteristika

For at vurdere det neutraliserende potentiale af SARS-CoV-2-specifikke antistoffer mod SARS CoV-2 VOC'er og hCoV'er, sera opnået fra dobbeltdoseret BNT162b2-vaccineret (n=13), AZD1222-vaccinerede (n=16) ​​og mRNA-1273-vaccinerede (n=7) personer med og uden en historie med SARS-CoV-2-infektion blev inspiceret ( Tabel 1).

Tabel 1. Demografiske og kliniske karakteristika for kohorten.

3.2. Neutralisering af SARS-CoV-2 varianter

Vi udførte først pMN-assays for at analysere størrelsen af ​​neutraliserende antistofresponser mod forfædres SARS-CoV-2 og varianter, uanset vaccinetype (figur 3A). Vores resultater viste, at Omicron BA.1 var den mindst neutraliserede VOC (24-fold fald, p =< 0.0001). As expected, we observed the samples from individuals with prior infection had higher neutralisation titers compared with immunologically naïve subjects. The serum from previously infected individuals (Figure 3B), neutralized the Alpha variant more effectively compared with the ancestral strain, as it showed a 1.3-fold decrease in median IC50 titre, followed by Eta and Delta variants, (3.4- and 4.5-fold decrease, respectively). Beta and Gamma variants were more resistant to neutralization (10.9- and 9.7-fold decrease, respectively), and Omicron BA.1 reached a 16.1-fold decrease compared with ancestral SARS-CoV-2. Notably, the majority of these subjects had received the BNT162b2 vaccine. Taken together, these results suggested that in vaccinated subjects the pre-existing immunity raised by natural infection with SARS-CoV-2, or a VOC is more effective in protecting against the spectrum of variants that emerged later over time, compared with immunity triggered by vaccination only. However, the recently emerged variants evolved mechanisms to evade the neutralizing antibody response.

Figur 3. Serumantistoffers evne til at neutralisere SARS-CoV-2 og VOC'er fra individer, der er vaccineret med to doser af enten BNT162b2, AZD1222 eller mRNA-1273. Neutraliserende antistofrespons mod forfædres SARS-CoV-2 og varianter hos tidligere inficerede individer (blå) og ikke-inficerede individer (røde), der modtager to doser af enten BNT162b2-, AZD1222- eller mRNA-1273-vacciner (A) . Wilcoxon matchede par underskrevne rangtests statistisk analyse blev brugt til at sammenligne forfædres SARS-CoV-2 med hver variant (A). Neutraliseringsprofiler af sera fra BNT162b2-vaccinerede forsøgspersoner med en historie med tidligere infektion. Der blev ikke brugt nogen statistisk test for BNT162b2 i panel C på grund af den lille prøvestørrelse med stor variation. (B). Neutraliseringsprofiler af de tre vaccinetyper mod varianter (C) og sammenlignet mellem vaccineplatforme. (D) Wilcoxon matchede par signerede rangtests statistisk analyse blev brugt til at sammenligne forfædres SARS-CoV-2 med hver variant i panel C. Kruskal–Wallis ANOVA blev brugt til statistisk analyse i panel D. ns {{23} } ikke signifikant, * p < 0.05, ** p < 0.01, *** p < 0,001, **** p Mindre end eller lig med 0,0001.

Vi analyserede derefter forsøgspersoner, der ikke havde oplevet SARS-CoV-2-infektion før vaccineadministration (figur 3C). Effektiviteten af ​​hver vaccineplatform blev analyseret med hensyn til evnen til at neutralisere både stamstammen og dens varianter. Vi observerede, at sera fra BNT162b2-vaccinerede forsøgspersoner havde høje median-IC50-titre sammenlignet med dem, der blev opnået fra mRNA-1273-- og AZD1222--vaccinerede individer. Mens Alpha-varianten ikke viste immunudslip hos nogen af ​​de vaccinerede forsøgspersoner, var alle VOC'erne resistente over for antistofneutralisering i forskellige grader (figur 3C). Vi var ikke i stand til at udtrække meningsfulde signifikansscore fra BNT162b2-prøverne på grund af få prøver (n=5) med en meget stor spredning i IC50-titre. Vi observerede ikke nogen statistisk signifikant forskel mellem de tre vaccineplatforme med hensyn til deres evner til at neutralisere alfa-, eta-, beta-, gamma- og BA.1-varianterne. Omvendt blev den største forskel mellem de tre vaccinetyper observeret med forfædre- og Delta-varianter, da mRNA-1273 viste henholdsvis 1.6- og 1.4-fold fald i median IC50-titre sammenlignet med BNT162b2, hvorimod AZD1222 viste et fald på 3.8- og 4.1-fold (figur 3D).

3.3. Neutralisering af sæsonbestemte HCoV'er

For at afgøre, om vaccination mod SARS-CoV-2 kan krydsbeskytte mod sæsonbestemte HCoV'er, spurgte vi, om en tidligere infektion med SARS-CoV-2 havde nogen indflydelse på antistofmedieret neutralisering af HCoV'erne (Figur 4A) ). Vi observerede ingen statistisk signifikante stigninger i neutraliserende titere mod hverken 229E eller HKU-1 mellem tidligere SARS-CoV-2-inficerede og naive individer. Omvendt blev der fundet et statistisk signifikant fald i neutraliserende titere mod NL63 efter administration af anden dosis hos vaccinerede forsøgspersoner, som oplevede SARS-CoV-2-infektion (p=0.033) sammenlignet med de naive (p {{ 16}}.063). Vi vurderede derefter, om en eller flere af vaccineplatformene ville booste titere mod HCoV'erne i alle forsøgspersoner, uanset deres tidligere infektionsstatus (figur 4B). Samlet set i vaccinerede forsøgspersoner var median antistofneutraliseringstiterne mod NL63 højere sammenlignet med dem mod 229E og HKU1, uanset vaccineplatformen (figur 4B). Det er bemærkelsesværdigt, at NL63 bruger ACE2 som en indgangsreceptor i målcellerne, ligesom SARS-CoV-2. Vaccinetypen havde ikke indflydelse på at øge de neutraliserende aktiviteter mod de tre sæsonbestemte coronavirusser, vi undersøgte efter den anden dosisadministration, med undtagelse af NL63 og HKU1. IC50-titere mod NL63 steg efter den anden dosis ved brug af mRNA-1273 (p=0.03), hvorimod 229E viste en statistisk signifikant stigning i IC50-titer hos kun AZD1222-vaccinerede individer (p { {37}}< 0.001). Conversely, after the second boost of the BNT162b2 vaccine, neutralization titers against HCoV HKU-1 decreased, probably due to the selection of antigen-specific plasma cells with lower affinity for the HKU1 spike. To better understand the impact of COVID-19 vaccination on the protection from seasonal HCoVs in subjects with or without a history of SARS-CoV-2 infection, we analysed the spike protein similarity of HCoVs HKU1, NL63, 229E, and SARS-CoV-2 to investigate whether a particular region could explain the neutralization differences (Figure 4C). The similarity plot generated by comparing pairwise similarity showed HKU1 had higher similarity in all spike regions to the SARS-CoV-2 spike compared with 229E and NL63, consistent with the viruses' taxonomy. However, HKU1 seems to have extra insertions at the C-terminal end of the RBD compared with the other two seasonals and SARS-CoV-2. Furthermore, the S2 region shows much higher similarity to SARS-CoV-2 in all three HCoVs compared with the S1 region (Figure 4C).

Figur 4. Sammenligning af neutraliserende responser i HCoV'er NL63, 229E og HKU1 mellem første- og andendosisvaccination mod SARS-CoV-2. Neutraliseringsprofil mod HCoV'er NL63, 229E og HKU1 i dobbeltdoserede BNT162b2-, mRNA--1273- eller AZD1222-vaccinerede forsøgspersoner med eller uden en historie med SARS-CoV-2-infektion. (EN). Neutraliserende antistoftitre mod de førnævnte HCoV'er efter den første og anden dosisadministration af BNT162b2-, mRNA{{20}}- eller AZD1222-vacciner. (B). Wilcoxon matchede par underskrevne rangtests statistisk analyse blev brugt i A og B. Similarity plots (C) viser, at HKU-1-spidsen har en mere lignende aminosyresekvens som SARS-CoV-2 sammenlignet med begge NL63 og 229E i alle områder af spikeproteinet. Stiplede linjer øverst viser aminosyreparvis lighed mellem SARS-CoV-2 og de 3 HCoV Spike-proteiner, plottet ved brug af en 400 aminosyrevinduestørrelse og et trin på 1. Positioner med mellemrum var udelukket fra vinduerne. Vandrette linjer på bunden indikerer resttilstedeværelse for hver af de 4 justerede coronavirusser på tværs af tilpasningslængden (farvetilstedeværelse=aminosyretilstedeværelse; farvefravær=hul). ns=ikke signifikant, * p < 0,05, *** p < 0,001.

4. Diskussion

I denne undersøgelse var vi i stand til direkte at sammenligne antistofneutraliseringstitre induceret af to m-RNA-baserede vacciner, BNT162b2 og mRNA-1273, og en adenoviral-baseret vaccine, AZD1222, mod SARS-CoV{{8} }, dets fremkomne varianter og tre sæsonbestemte HCoV'er. Vores data om antistofneutralisering mod SARS-CoV-2 og dets varianter hos vaccinerede forsøgspersoner, med eller uden tidligere infektionshistorie, stemmer overens med det, der er rapporteret i litteraturen [2,4,5,7,34-38 ]. Vi bekræftede, at vaccination med to doser af vacciner inducerede antistoffer i stand til at neutralisere SARS-CoV-2 og VOC'er, hvor BNT162b2 fremkaldte de højeste neutraliseringstitre, efterfulgt af mRNA-1273 og AZD1222. På trods af deres forskelle i neutraliseringstitre er alle tre vacciner blevet rapporteret at have høj effektivitet til at forebygge alvorlig COVID-19 [39-41]. Omicron BA.1-varianten var den mest undvigende af alle VOC'er analyseret i denne undersøgelse (figur 3). Det stærkt muterede spidsprotein af BA.1-varianten udgjorde faktisk udfordringer for effektiviteten af ​​de nuværende vacciner til at beskytte mod COVID-19 og påpegede behovet for at overvåge beskyttelsen mod dette og den nyligt opståede SARS-CoV{ {31}} varianter, nemlig Omicron BA.4 og BA.5. Bivalente formuleringer af mRNA-baserede vacciner, der indeholder både mRNA'et fra spidsen af ​​den forfædres SARS-CoV-2 og den, der er fælles mellem BA.4- og BA.5-afstamningerne, er blevet designet og godkendt for at modvirke unddragelsen af ​​immunresponset fremkaldt af det originale vaccinedesign.

HCoV'er er globalt distribueret og menes at inducere kortvarige beskyttende antistoffer [42]. Derfor er der stor sandsynlighed for, at geninfektion forbliver forhøjet, især i vinterperioderne [13,43-45] på trods af høj seroprevalens [43,45,46]. Det diskuteres i øjeblikket, om tidligere infektion med sæsonbestemte HCoV'er fremkalder krydsreaktive antistoffer mod SARS-CoV-2, og endnu vigtigere, om dette udmønter sig i beskyttelse mod SARS-CoV-2. Krydsreaktive antistoffer [47-54] og T-celle-responser [55-61] blev påvist i præ-pandemiske sera og raske donorer; lignende eksperimentelle tilgange har imidlertid vist, at det modsatte er tilfældet af andre efterforskere [62]. I mange af de førnævnte artikler, der afslørede krydsreaktive antistoffer i præ-pandemiske prøver, var antallet af krydsreaktive prøver desuden en lille del af det samlede analyserede sera, hvilket tyder på, at krydsreaktiviteten, mens den eksisterer, er lav . Det samme spørgsmål er blevet rejst om antistoffer fremkaldt af COVID-19-vacciner, med undersøgelser, der viser krydsreaktive antistoffer mod nogle, men ikke alle, sæsonbestemte HCoV'er [63-65]. SARS-CoV-2-spidsproteinvaccination viste sig at inducere krydsreaktive antistoffer mod både alfa- og betacoronavirus i makakaber [66]. Det er vigtigt at udlede, om krydsreaktive antistoffer oversættes til beskyttende, neutraliserende antistoffer mod SARS-CoV-2. Nogle rapporter antydede, at selvom der er et lille løft i antistoffer mod HCoV'er under SARS-CoV-2-infektion, er de ikke forbundet med beskyttelse [67]. Tilsvarende viste undersøgelser, at tidligere infektion med HCoV'er ikke beskyttede mod SARS-CoV-2-infektion og sygdom [68,69].

cistanche tubulosa-forbedrer immunsystemet

Vi fandt ikke noget boost af neutraliserende antistoftitre mod HKU1 i vores kohorte af SARS-CoV-2-vaccinerede forsøgspersoner, uanset deres SARS-CoV-2 præ-infektionsstatus, med undtagelse af forsøgspersoner, der blev administreret med BNT162b2. Dette er i modsætning til to rapporter, der observerede et boost i HKU-1-titre efter vaccination mod SARS-CoV-2 af BNT162b2 [63,64]. Hicks et al. viste, at antistoffer, der reagerede på HCoV-OC43 og HCoVHKU1, havde minimal krydsreaktivitet med SARS-CoV -2 i overensstemmelse med sekvenshomologien af ​​disse proteiner [54]. Desuden øgede en tidligere SARS-CoV-2-infektion ikke krydsneutraliseringen mod hverken HKU1 eller det mere fylogenetisk relaterede HCoV-229E (Figur 4A). En rapport antydede, at HKU1 kan have en anden kandidatreceptor, som endnu ikke er blevet identificeret, på grund af tilstedeværelsen af ​​en formodet RBD, fjernt fra sialinsyrebindende regioner [70,71]. Det skal også bemærkes, at neutraliserende evne ikke kun kan være afhængig af den parvise lighed mellem aminosyrer i proteinet, men også af korte insertioner og deletioner, der kan ændre proteinets strukturelle konformation. For eksempel kan den HKU-1-specifikke indsættelse i den C-terminale ende af RBD (Figur 4C) delvist forklare vores neutraliseringsresultater. Omvendt fandt vi, at den anden dosisadministration hos naive forsøgspersoner øgede det beskyttende antistofrespons mod NL63 sammenlignet med det, der blev opnået hos tidligere inficerede forsøgspersoner, der fik den samme dosis. Dette skyldtes sandsynligvis, at yderligere eksponeringer for spike-antigenet ikke havde en effekt på antistofneutralisering mod NL63.

Forskellene i antistofneutralisering mellem HCoV'erne kan skyldes forskellene i de spidser, der anvendes af vaccinationsplatformene. BNT162b27 koder for en spike i fuld længde med K986P- og V987P-mutationssteder for at stabilisere proteinets præfusionskonformation [72]. mRNA-1273-vaccinen indeholder kodningssekvensen for et spike-glycoprotein stabiliseret af de samme prolinsubstitutioner, som anvendes i BNT162b2-vaccinen, med et transmembrananker og et intakt S1-S2-spaltningssted. Præfusionskonformationen stabiliseres af de konsekutive prolinsubstitutioner, som er placeret i S2-underenheden i toppen af ​​den centrale helix [73]. Omvendt udtrykkes en native-lignende spids af AZD1222-vaccinen. Da vores naive forsøgspersoner blev administreret med AZD1222-vaccinen, kan vi spekulere i, at den native form af spikeproteinet udløste udviklingen af ​​højere neutraliserende antistoftitre sammenlignet med dem, der induceres af det præfusionsstabiliserede protein. Omvendt forstærkede den anden immunogene eksponering for SARS-CoV-2-spidsen den neutraliserende respons mod NL63 eller 229E (figur 4B), som det tidligere er blevet rapporteret [67], afhængigt af vaccineplatformen, uanset præ- infektionsstatus. Interessant nok observerede en anden rapport den samme krydsneutraliserende aktivitet, selvom dette var uafhængigt af vaccineplatformen [74]. Vi spekulerer i, at krydsreaktivitet kan opstå på grund af ligheden i epitoper i det receptorbindende motiv (RBM) af NL63 til SARS-CoV-2, da begge vira deler ACE-2 som deres indgangsreceptor [75 ]. Tilsvarende er en epitop, der overlapper S2-fusionspeptidet i 229E, blevet rapporteret at fremkalde krydsreaktivitet mod SARS-CoV-2 [48]. Song et al. beskrev beskyttende neutraliserende antistoffer rettet mod S2-subdomænet [53]. Desuden fandt en rapport under det oprindelige SARS-CoV-1-udbrud også krydsreaktive antistoffer mod NL63 og 229E [76], hvilket styrker hypotesen om delte epitoper mellem Alphacoronavirus og Betacoronavirus. S-proteinet i NL63 indeholder ikke furin-genkendelsesstedet og spaltes ikke under biogenese [77]. Tilsvarende mangler spidsproteinet udtrykt af mRNA1273-vaccinen spaltningsstedet; derfor kan konformationen af ​​proteinet være ens og kan udløse neutraliserende antistoffer mod delte epitoper, og som boostes efter en anden eksponering for det samme antigen.

Den antigene natur af spidsproteinet, der udtrykkes af de forskellige vacciner, sammen med de mange konformationer, de kan erhverve, kan påvirke udviklingen af ​​neutraliserende antistoffer med forskellige affiniteter mod flere epitoper i spidsproteinet. Da AZD-1222-spidsen ikke indeholder de to prolinmutationer for at stabilisere dens spids til en trimer præfusionsstruktur [78,79], kunne tilstedeværelsen af ​​en post-fusionsspids potentielt fremkalde et større immunrespons mod epitoper i S2-domænet. Dette kan forklare, hvorfor vi ikke observerede noget løft i neutraliserende titere mod 229E i hverken mRNA-baserede, præfusionsstabiliserede immunogener eller vaccinerede prøver. I sidste ende, på trods af at vi observerer et boost i titere, er det umuligt for os at sige, om dette oversættes til beskyttende titere, da korrelater for beskyttelse mod SARS-CoV-2 endnu ikke er defineret. Der er flere begrænsninger i vores undersøgelse at overveje. Vores data ville have draget fordel af et større antal prøver i alle vaccineplatformstyper og kontrolprøver af ikke-vaccinerede individer, som enten er blevet inficeret med SARS-CoV-2 eller ej. Desuden analyserede vi ikke baseline-niveauerne af krydsreaktive neutraliserende antistoffer mod sæsonbestemte coronavirus i vores kohorte af vaccinerede forsøgspersoner. En pan-coronavirus-vaccine ville fremkalde antistoffer, der genkender og neutraliserer en bred vifte af coronavirus. Dette er udfordrende på grund af den genetiske natur af disse RNA-vira, der ofte muterer og inducerer en immunitet, der aftager over tid, hvilket øger sandsynligheden for geninfektion. Derfor er identifikation af nøgleepitoper lokaliseret i de mest konserverede regioner af spikeproteinet, især ved S2-underenheden, relevant for potentielt at inducere neutraliserende antistoffer med bredere affinitet til de cellulære receptorer, der medierer viral indtræden. Adskillige vaccinekandidater er blevet formuleret, og nogle er baseret på dobbelte antigener, herunder både spike og nukleocapsid (N) komponenter [80]. Disse formuleringer er på det prækliniske stadium, da de kan give bredere og mere holdbare humorale og cellulære immunresponser mod coronavirus [80].

Referencer

1. Zhu, N.; Zhang, D.; Wang, W.; Li, X.; Yang, B.; Sang, J.; Zhao, X.; Huang, B.; Shi, W.; Lu, R.; et al. En ny coronavirus fra patienter med lungebetændelse i Kina, 2019. N. Engl. J. Med. 2020, 382, ​​727-733. [CrossRef] [PubMed]

2. Altmann, DM; Boyton, RJ; Beale, R. Immunitet mod SARS-CoV-2 varianter af bekymring. Science 2021, 371, 1103-1104. [CrossRef] [PubMed]

3. Burki, T. Understanding Variants of SARS-CoV-2. Lancet 2021, 397, 462. [CrossRef] [PubMed]

4. Garcia-Beltran, WF; Lam, EC; St. Denis, K.; Nitido, AD; Garcia, ZH; Hauser, BM; Feldman, J.; Pavlovic, MN; Gregory, DJ; Poznansky, MC; et al. Flere SARS-CoV-2-varianter undslipper neutralisering ved vaccine-induceret humoral immunitet. Celle 2021, 184, 2372-2383. [CrossRef] [PubMed]

5. Hoffmann, M.; Arora, P.; Groß, R.; Seidel, A.; Hörnich, BF; Hahn, AS; Krüger, N.; Graichen, L.; Hofmann-Winkler, H.; Kempf, A.; et al. SARS-CoV-2 Variant B.1.351 og P.1 Undslipper fra neutraliserende antistoffer. Celle 2021, 184, 2384-2393. [CrossRef]

6. Cantoni, D.; Mayora-Neto, M.; Nadesalingam, A.; Wells, DA; Carnell, GW; Ohlendorf, L.; Ferrari, M.; Palmer, P.; Chan, ACY; Smith, P.; et al. Neutraliseringshierarki af SARS-CoV-2 bekymringsvarianter ved hjælp af standardiserede, kvantitative neutraliseringsassays afslører en sammenhæng med sygdommens sværhedsgrad; Mod dechifrering af beskyttende antistoftærskler. Foran. Immunol. 2022, 13, 773982. [CrossRef]

7. Planas, D.; Bruel, T.; Grzelak, L.; Guivel-Benhassine, F.; Staropoli, I.; Porrot, F.; Planchais, C.; Buchrieser, J.; Rajah, MM; Biskop, E.; et al. Følsomhed af infektiøs SARS-CoV-2 B.1.1.7 og B.1.351 varianter over for neutraliserende antistoffer. Nat. Med. 2021, 27, 917-924. [CrossRef]

8. Lustig, Y.; Zuckerman, N.; Nemet, I.; Atari, N.; Kliker, L.; Regev-Yochay, G.; Sapir, E.; Mor, O.; Alroy-Preis, S.; Mendelson, E.; et al. Neutraliseringskapacitet mod Delta (B.1.617.2) og andre bekymringsvarianter efter Comirnaty (BNT162b2, BioNTech/Pfizer)-vaccination hos sundhedsarbejdere, Israel. Eurosurveillance 2021, 26, 2100557. [CrossRef]

9. Ksiazek, TG; Erdman, D.; guldsmed, CS; Zaki, SR; Peret, T.; Emery, S.; Tong, S.; Urbani, C.; Comer, JA; Lim, W.; et al. En ny coronavirus associeret med alvorligt akut respiratorisk syndrom. N. Engl. J. Med. 2003, 348, 1953-1966. [CrossRef]

10. Zaki, AM; van Boheemen, S.; Bestebroer, TM; Osterhaus, ADME; Fouchier, RAM-isolering af en ny coronavirus fra en mand med lungebetændelse i Saudi-Arabien. N. Engl. J. Med. 2012, 367, 1814-1820. [CrossRef]

11. Liu, DX; Liang, JQ; Fung, TS Human Coronavirus-229E, -OC43, -NL63 og -HKU1 (Coronaviridae). I Encyclopedia of Virology, 4. udg.; Bamford, DH, Zuckerman, M., red.; Academic Press: Oxford, Storbritannien, 2021; s. 428–440. ISBN 978-0-12-814516-6.

12. de Wit, E.; van Doremalen, N.; Falzarano, D.; Munster, VJ SARS og MERS: Nylig indsigt i nye coronavirus. Nat. Rev. Microbiol. 2016, 14, 523-534. [CrossRef]

13. Gaunt, ER; Hardie, A.; Claas, EF-Domstolen; Simmonds, P.; Templeton, KE Epidemiologi og kliniske præsentationer af de fire humane Coronaviruss 229E, HKU1, NL63 og OC43 opdaget over 3 år ved hjælp af en ny multipleks realtids-PCR-metode. J. Clin. Microbiol. 2010, 48, 2940-2947. [CrossRef]

14. Da Veiga, ABG; Martins, LG; Riediger, I.; Mazetto, A.; Debur, MdC; Gregianini, TS Mere end bare en almindelig forkølelse: Endemiske Coronaviruss OC43, HKU1, NL63 og 229E forbundet med alvorlig akut luftvejsinfektion og dødstilfælde blandt raske voksne. J. Med. Virol. 2021, 93, 1002-1007. [CrossRef]

15. Arden, KE; Nissen, MD; Sloots, TP; Mackay, IM New Human Coronavirus, HCoV-NL63, associeret med svær sygdom i de nedre luftveje i Australien. J. Med. Virol. 2005, 75, 455-462. [CrossRef]

16. Hand, J.; Rose, EB; Salinas, A.; Lu, X.; Sakthivel, SK; Schneider, E.; Watson, JT Udbrud af alvorlig luftvejssygdom forbundet med humant coronavirus NL63 i en langtidsplejefacilitet. Emerg. Inficere. Dis. 2018, 24, 1964-1966. [CrossRef]

17. Hoffmann, M.; Kleine-Weber, H.; Schroeder, S.; Krüger, N.; Herrler, T.; Erichsen, S.; Schiergens, TS; Herrler, G.; Wu, N.-H.; Nitsche, A.; et al. SARS-CoV-2 celleindgang afhænger af ACE2 og TMPRSS2 og er blokeret af en klinisk dokumenteret proteasehæmmer. Celle 2020, 181, 271-280.e8. [CrossRef]

18. Hofmann, H.; Pyrc, K.; van der Hoek, L.; Geier, M.; Berkhout, B.; Pöhlmann, S. Human Coronavirus NL63 anvender Corona-receptoren for alvorligt akut respiratorisk syndrom til cellulær indtrængning. Proc. Natl. Acad. Sci. USA 2005, 102, 7988-7993. [CrossRef]

19. Hulswit, RJG; Lang, Y.; Bakkers, MJG; Li, W.; Li, Z.; Schouten, A.; Ophorst, B.; van Kuppeveld, FJM; Boons, G.-J.; Bosch, B.-J.; et al. Humane Coronaviruss OC43 og HKU1 binder til 9-O-acetylerede sialinsyrer via et konserveret receptorbindingssted i Spike Protein Domain A. Proc. Natl. Acad. Sci. USA 2019, 116, 2681-2690. [CrossRef]

20. Yeager, CL; Ashmun, RA; Williams, RK; Cardellichio, CB; Shapiro, LH; Se på; Holmes, KV Human Aminopeptidase N er en receptor for Human Coronavirus 229E. Nature 1992, 357, 420-422. [CrossRef]

21. Wu, K.; Li, W.; Peng, G.; Li, F. Krystalstruktur af NL63 respiratorisk Coronavirus-receptorbindende domæne komplekst med dets menneskelige receptor. Proc. Natl. Acad. Sci. USA 2009, 106, 19970-19974. [CrossRef]

22. Meyerholz, DK; Perlman, S. Beskytter almindelig forkølelsesvirusinfektion mod alvorlig SARS-CoV-2-sygdom? J. Clin. Undersøg. 2021, 131. [CrossRef] [PubMed]

23. Ringlander, J.; Martner, A.; Nilsson, S.; Westin, J.; Lindh, M.; Hellstrand, K. Incidens og sværhedsgrad af Covid-19 hos patienter med og uden tidligere verificerede infektioner med almindelige forkølelses-coronavirus. J. Infect. Dis. 2021, 223, 1831-1832. [CrossRef]

24. Schnierle, BS Svar til Ringlander et al. J. Infect. Dis. 2021, 223, 1833. [CrossRef] [PubMed]

25. Beretta, A.; Cranage, M.; Zipeto, D. Udløser krydsreaktiv immunitet COVID-19 immunopatogenese? Foran. Immunol. 2020, 11, 2695. [CrossRef] [PubMed]

26. Creech, CB; Walker, SC; Samuels, RJ SARS-CoV-2-vacciner. JAMA 2021, 325, 1318-1320. [CrossRef]

27. Tao, K.; Tzou, PL; Nouhin, J.; Gupta, RK; de Oliveira, T.; Kosakovsky Pond, SL; Fera, D.; Shafer, RW Den biologiske og kliniske betydning af nye SARS-CoV-2-varianter. Nat. Rev. Genet. 2021, 22, 757-773. [CrossRef]

28. Nguyen, L.-T.; Schmidt, HA; von Haeseler, A.; Minh, BQ IQ-TREE: En hurtig og effektiv stokastisk algoritme til estimering af maksimal sandsynlighed for fylogener. Mol. Biol. Evol. 2015, 32, 268-274. [CrossRef]

29. Hoang, DT; Chernomor, O.; von Haeseler, A.; Minh, BQ; Vinh, LS UFBoot2: Forbedring af den ultrahurtige bootstrap-tilnærmelse. Mol. Biol. Evol. 2018, 35, 518-522. [CrossRef]

30. Kalyaanamoorthy, S.; Minh, BQ; Wong, TKF; von Haeseler, A.; Jermiin, LS ModelFinder: Hurtigt modelvalg til nøjagtige fylogenetiske estimater. Nat. Metoder 2017, 14, 587-589. [CrossRef]

31. Katoh, K.; Standley, DM MAFFT Multiple Sequence Alignment Software Version 7: Forbedringer i ydeevne og brugervenlighed. Mol. Biol. Evol. 2013, 30, 772-780. [CrossRef]

32. Genova, CD; Sampson, A.; Scott, S.; Cantoni, D.; Mayora-Neto, M.; Bentley, E.; Mattiuzzo, G.; Wright, E.; Derveni, M.; Auld, B.; et al. Produktion, Titrering, Neutralisering, Opbevaring og Lyofilisering af Svært Akut Respiratorisk Syndrom Coronavirus 2 (SARS-CoV-2) Lentivirale Pseudotyper. Bio-protokol 2021, 11, e4236. [CrossRef]

33. Ferrara, F.; Temperton, N. Pseudotypeneutraliseringsassays: Fra laboratoriebænk til dataanalyse. Metoder Protoc. 2018, 1, 8. [CrossRef]

34. Liu, C.; Ginn, HM; Dejnirattisai, W.; Supasa, P.; Wang, B.; Tuekprakhon, A.; Nutalai, R.; Zhou, D.; Mentzer, AJ; Zhao, Y.; et al. Reduceret neutralisering af SARS-CoV-2 B.1.617 med vaccine og rekonvalescent serum. Celle 2021, 184, 4220-4236.e13. [CrossRef]

35. Shen, X.; Tang, H.; Pajon, R.; Smith, G.; Glenn, GM; Shi, W.; Korber, B.; Montefiori, DC Neutralisering af SARS-CoV-2 varianter B.1.429 og B.1.351. N. Engl. J. Med. 2021, 384, 2352-2354. [CrossRef]

36. Shen, X.; Tang, H.; McDanal, C.; Wagh, K.; Fischer, W.; Theiler, J.; Yoon, H.; Li, D.; Haynes, BF; Sanders, KO; et al. SARS-CoV-2 Variant B.1.1.7 er modtagelig for neutraliserende antistoffer fremkaldt af forfædres spikevacciner. Cell Host Microbe 2021, 29, 529-539. [CrossRef]

37. Willett, BJ; Grove, J.; MacLean, OA; Wilkie, C.; De Lorenzo, G.; Furnon, W.; Cantoni, D.; Scott, S.; Logan, N.; Ashraf, S.; et al. SARS-CoV-2 Omicron er en immunudslipsvariant med en ændret celleindgangsvej. Nat. Microbiol. 2022, 7, 1161-1179. [CrossRef]

38. Siracusano, G.; Ruggiero, A.; Bisoffi, Z.; Piubelli, C.; Carbonare, LD; Valentin, MT; Mayora-Neto, M.; Temperton, N.; Lopalco, L.; Zipeto, D. Forskelligt henfald af antistofrespons og VOC-følsomhed hos naive og tidligere inficerede forsøgspersoner 15 uger efter vaccination med BNT162b2. J. Transl. Med. 2022, 20, 22. [CrossRef]

39. Polack, FP; Thomas, SJ; Kitchin, N.; Absalon, J.; Gurtman, A.; Lockhart, S.; Perez, JL; Pérez Marc, G.; Moreira, ED; Zerbini, C.; et al. Sikkerhed og effektivitet af BNT162b2 MRNA Covid-19-vaccinen. N. Engl. J. Med. 2020, 383, 2603-2615. [CrossRef]

40. Baden, LR; El Sahly, HM; Essink, B.; Kotloff, K.; Frey, S.; Novak, R.; Diemert, D.; Spector, SA; Rouphael, N.; Creech, CB; et al. Virkning og sikkerhed af MRNA-1273 SARS-CoV-2-vaccinen. N. Engl. J. Med. 2021, 384, 403-416. [CrossRef]

41. Emary, KRW; Golubchik, T.; Aley, PK; Ariani, CV; Angus, B.; Bibi, S.; Blane, B.; Bonsall, D.; Cicconi, P.; Charlton, S.; et al. Effektivitet af ChAdOx1 NCoV-19 (AZD1222)-vaccine mod SARS-CoV-2 Bekymringsvariant 202012/01 (B.1.1.7): En eksplorativ analyse af et randomiseret kontrolleret forsøg. Lancet 2021, 397, 1351-1362. [CrossRef]

42. Edridge, AWD; Kaczorowska, J.; Hoste, ACR; Bakker, M.; Klein, M.; Loens, K.; Jebbink, MF; Matser, A.; Kinsella, CM; Rueda, P.; et al. Sæsonbestemt Coronavirus-beskyttende immunitet er kortvarig. Nat. Med. 2020, 26, 1691-1693. [CrossRef] [PubMed]

43. Aldridge, RW; Lewer, D.; Beale, S.; Johnson, AM; Zambon, M.; Hayward, AC; Fragaszy, EB Seasonality and Immunity to Laboratory-Confirmed Seasonal Coronaviruses (HCoV-NL63, HCoV-OC43 og HCoV-229E): Resultater fra Flu Watch Cohort Study. Velkommen Open Res 2020, 5, 52. [CrossRef] [PubMed]

44. Zhang, S.-F.; Tuo, J.-L.; Huang, X.-B.; Zhu, X.; Zhang, D.-M.; Zhou, K.; Yuan, L.; Luo, H.-J.; Zheng, B.-J.; Yuen, K.-Y.; et al. Epidemiologiske karakteristika for humane Coronaviruss hos patienter med luftvejsinfektionssymptomer og fylogenetisk analyse af HCoV-OC43 under 2010-2015 i Guangzhou. PLoS ONE 2018, 13, e0191789. [CrossRef] [PubMed]

45. Byington, CL; Ampofo, K.; Stockmann, C.; Adler, FR; Herbener, A.; Miller, T.; Sheng, X.; Blaschke, AJ; Crisp, R.; Pavia, AT Fællesskabsovervågning af luftvejsvirus blandt familier i Utah Bedre identifikation af bakterier-langsgående viral epidemiologi (BIG-LoVE) undersøgelse. Clin. Inficere. Dis. 2015, 61, 1217-1224. [CrossRef] [PubMed]

46. ​​Wells, DA; Cantoni, D.; Mayora-Neto, M.; Genova, CD; Sampson, A.; Ferrari, M.; Carnell, G.; Nadesalingam, A.; Smith, P.; Chan, A.; et al. Menneskelig sæsonbestemt Coronavirus-neutralisering og COVID-19 sværhedsgrad. J. Med. Virol. 2022, 94, 4820-4829. [CrossRef]

47. Shrwani, K.; Sharma, R.; Krishnan, M.; Jones, T.; Mayora-Neto, M.; Cantoni, D.; Temperton, NJ; Dobson, SL; Subramaniam, K.; McNamara, PS; et al. Påvisning af serumkrydsreaktive antistoffer og hukommelsesrespons på SARS-CoV-2 i præpandemiske og post-post-COVID-19 rekonvalescente prøver. J. Infect. Dis. 2021, 224, 1305-1315. [CrossRef]

48. Ng, KW; Faulkner, N.; Cornish, GH; Rosa, A.; Harvey, R.; Hussain, S.; Ulferts, R.; Earl, C.; Wrobel, AG; Benton, DJ; et al. Eksisterende og de Novo Humoral Immunitet mod SARS-CoV-2 hos mennesker. Science 2020, 370, 1339-1343. [CrossRef]

49. Woudenberg, T.; Pelleau, S.; Anna, F.; Attia, M.; Donnadieu, F.; Gravet, A.; Lohmann, C.; Seraphin, H.; Guiheneuf, R.; Delamare, C.; et al. Humoral immunitet over for SARS-CoV-2 og sæsonbestemte coronavirus hos børn og voksne i det nordøstlige Frankrig. EBioMedicine 2021, 70, 103495. [CrossRef]

50. Tso, FY; Lidenge, SJ; Peña, PB; Clegg, AA; Ngowi, JR; Mwaiselage, J.; Ngalamika, O.; Julius, P.; West, JT; Wood, C. Høj prævalens af allerede eksisterende serologisk krydsreaktivitet mod alvorligt akut respiratorisk syndrom Coronavirus-2 (SARS-CoV-2) i Afrika syd for Sahara. Int. J. Infect. Dis. 2021, 102, 577-583. [CrossRef]

51. Laing, ED; Sterling, SL; Richard, SA; Phogat, S.; Samuels, EC; Epsi, NJ; Yan, L.; Moreno, N.; Coles, C.; Mehalko, J.; et al. En Betacoronavirus Multiplex Microsphere Immunoassay detekterer tidlig SARS-CoV-2 serokonvertering og kontrollerer for allerede eksisterende sæsonbestemt humant coronavirus-antistofkrydsreaktivitet. medRxiv 2020. [CrossRef]

52. Ladner, JT; Henson, SN; Boyle, AS; Engelbrektson, AL; Fink, ZW; Rahee, F.; D'ambrozio, J.; Schaecher, KE; Stone, M.; Dong, W.; et al. Epitopopløst profilering af SARS-CoV-2 antistofrespons identificerer krydsreaktivitet med endemiske humane coronavirus. Cell Rep. Med. 2021, 2, 100189. [CrossRef]

53. Sang, G.; Han, W.; Callaghan, S.; Anzanello, F.; Huang, D.; Ricketts, J.; Torres, JL; Beutler, N.; Peng, L.; Vargas, S.; et al. Krydsreaktive serum- og hukommelses-B-celleresponser på spikeprotein i SARS-CoV-2 og endemisk coronavirusinfektion. Nat. Commun. 2021, 12, 2938. [CrossRef]

54. Hicks, J.; Klumpp-Thomas, C.; Kalish, H.; Shunmugavel, A.; Mehalko, J.; Denson, J.-P.; Snead, KR; Drew, M.; Corbett, KS; Graham, BS; et al. Serologisk krydsreaktivitet af SARS-CoV-2 med endemiske og sæsonbestemte betacoronavirus. J. Clin. Immunol. 2021, 41, 906-913. [CrossRef]

55. Grifoni, A.; Weiskopf, D.; Ramirez, SI; Mateus, J.; Dan, JM; Moderbacher, CR; Rawlings, SA; Sutherland, A.; Premkumar, L.; Jadi, RS; et al. Mål for T-celleresponser på SARS-CoV-2 Coronavirus hos mennesker med COVID-19-sygdom og ueksponerede individer. Celle 2020, 181, 1489-1501.e15. [CrossRef]

56. Mateus, J.; Grifoni, A.; Tarke, A.; Sidney, J.; Ramirez, SI; Dan, JM; Burger, ZC; Rawlings, SA; Smith, DM; Phillips, E.; et al. Selektive og krydsreaktive SARS-CoV-2 T-celleepitoper hos ueksponerede mennesker. Science 2020, 370, 89-94. [CrossRef]

57. Sekine, T.; Perez-Potti, A.; Rivera-Balesteros, O.; Strålin, K.; Gorin, J.-B.; Olsson, A.; Llewellyn-Lacey, S.; Kamal, H.; Bogdanovic, G.; Muschiol, S.; et al. Robust T-celleimmunitet hos rekonvalescente personer med asymptomatisk eller mild COVID-19. Celle 2020, 183, 158-168.e14. [CrossRef]

58. Schulien, I.; Kemming, J.; Oberhardt, V.; Wild, K.; Seidel, LM; Killmer, S.; Sagar; Daul, F.; Salvat Lago, M.; Decker, A.; et al. Karakterisering af allerede eksisterende og inducerede SARS-CoV-2-specifikke CD8+ T-celler. Nat Med 2021, 27, 78-85. [CrossRef]

59. Reynolds, CJ; Swadling, L.; Gibbons, JM; Pade, C.; Jensen, MP; Diniz, MO; Schmidt, NM; Butler, DK; Amin, OE; Bailey, SNL; et al. Uoverensstemmende neutraliserende antistof- og T-celleresponser ved asymptomatisk og mild SARS-CoV-2-infektion. Sci. Immunol. 2020, 5, eabf3698. [CrossRef]

60. Lav, JS; Vaqueirinho, D.; Mele, F.; Foglierini, M.; Jerak, J.; Perotti, M.; Jarrossay, D.; Jovic, S.; Perez, L.; Cacciatore, R.; et al. Klonal analyse af immundominans og krydsreaktivitet af CD4 T-cellerespons på SARS-CoV-2. Science 2021, 372, 1336-1341. [CrossRef]

61. Echeverría, G.; Guevara, Á.; Coloma, J.; Ruiz, AM; Vasquez, MM; Tejera, E.; de Waard, JH Præ-eksisterende T-celleimmunitet mod SARS-CoV-2 i ueksponerede sunde kontroller i Ecuador, som påvist med en COVID-19 interferon-gamma-frigivelsesanalyse. Int. J. Infect. Dis. 2021, 105, 21-25. [CrossRef]

62. Poston, D.; Weisblum, Y.; Wise, H.; Templeton, K.; Jenks, S.; Hatziioannou, T.; Bieniasz, P. Fravær af alvorligt akut respiratorisk syndrom Coronavirus 2 Neutraliserende aktivitet i præpandemiske sera fra personer med nylig sæsonbetinget coronavirusinfektion. Clin. Inficere. Dis. 2020, 73, e1208–e1211. [CrossRef] [PubMed]

63. Amanat, F.; Thapa, M.; Lei, T.; Ahmed, SMS; Adelsberg, DC; Carreño, JM; Strohmeier, S.; Schmitz, AJ; Zafar, S.; Zhou, JQ; et al. SARS-CoV-2 MRNA-vaccination inducerer funktionelt forskellige antistoffer mod NTD, RBD og S2. Celle 2021, 184, 3936–3948.e10. [CrossRef]

64. Angyal, A.; Longet, S.; Moore, SC; Payne, RP; Harding, A.; Tipton, T.; Rongkard, P.; Ali, M.; Hering, LM; Meardon, N.; et al. T-celle- og antistofreaktioner på første BNT162b2-vaccinedosis i tidligere inficerede og SARS-CoV-2-Naive britiske sundhedsarbejdere: et multicenter prospektivt kohortestudie. Lancet Microbe 2022, 3, e21–e31. [CrossRef] [PubMed]

65. Skelly, DT; Harding, AC; Gilbert-Jaramillo, J.; Knight, ML; Longet, S.; Brown, A.; Adele, S.; Adland, E.; Brown, H.; Tipton, T.; et al. To doser SARS-CoV-2-vaccination inducerer robuste immunresponser på nye SARS-CoV-2-varianter af bekymring. Nat. Commun. 2021, 12, 5061. [CrossRef] [PubMed]

66. Grobben, M.; van der Straten, K.; Brouwer, PJ; Brinkkemper, M.; Maisonnasse, P.; Dereuddre-Bosquet, N.; Appelman, B.; Lavell, AA; van Vught, LA; Burger, JA; et al. Krydsreaktive antistoffer efter SARS-CoV-2-infektion og vaccination. eLife 2021, 10, e70330. [CrossRef]

67. Anderson, EM; Goodwin, EC; Verma, A.; Arevalo, CP; Bolton, MJ; Weirick, ME; Gouma, S.; McAllister, CM; Christensen, SR; Weaver, J.; et al. Sæsonbestemte humane coronavirus-antistoffer forstærkes ved SARS-CoV-2-infektion, men ikke forbundet med beskyttelse. Celle 2021, 184, 1858–1864.e10. [CrossRef]

68. Sermet-Gaudelus, I.; Temam, S.; Huon, C.; Behillil, S.; Gajdos, V.; Bigot, T.; Lurier, T.; Chrétien, D.; Backovic, M.; Delaunay Moisan, A.; et al. Tidligere infektion med sæsonbestemte coronaviruses, som vurderet af serologi, forhindrer ikke SARS-CoV-2-infektion og sygdom hos børn, Frankrig, april til juni 2020. Eurosurveillance 2021, 26. 2001782. [CrossRef]

69. Gombar, S.; Bergquist, T.; Pejaver, V.; Hammarlund, NØ; Murugesan, K.; Mooney, S.; Shah, N.; Pinsky, BA; Banaei, N. SARS CoV-2-infektion og COVID-19-alvorlighed hos personer med tidligere sæsonbetinget Coronavirus-infektion. Diagn. Microbiol. Inficere. Dis. 2021, 100, 115338. [CrossRef]

70. Qian, Z.; Ou, X.; Góes, LGB; Osborne, C.; Castano, A.; Holmes, KV; Dominguez, SR Identifikation af det receptorbindende domæne af Spike Glycoproteinet af Human Betacoronavirus HKU1. J. Virol. 2015, 89, 8816-8827. [CrossRef]

71. Ou, X.; Guan, H.; Qin, B.; Mu, Z.; Wojdyla, JA; Wang, M.; Dominguez, SR; Qian, Z.; Cui, S. Krystalstruktur af det receptorbindende domæne af Spike Glycoproteinet af Human Betacoronavirus HKU1. Nat Commun 2017, 8, 15216. [CrossRef]

72. Vogel, AB; Kanevsky, I.; Che, Y.; Swanson, KA; Muik, A.; Vormehr, M.; Kranz, LM; Walzer, KC; Hein, S.; Güler, A.; et al. BNT162b-vacciner beskytter Rhesus-makaker mod SARS-CoV-2. Nature 2021, 592, 283-289. [CrossRef]

73. Jackson, LA; Anderson, EJ; Rouphael, NG; Roberts, PC; Makhene, M.; Coler, RN; McCullough, MP; Chappell, JD; Denison, MR; Stevens, LJ; et al. En MRNA-vaccine mod SARS-CoV-2—Foreløbig rapport. N. Engl. J. Med. 2020, 383, 1920-1931. [CrossRef]

74. Lawrenz, J.; Xie, Q.; Zech, F.; Weil, T.; Seidel, A.; Krnavek, D.; van der Hoek, L.; Munch, J.; Müller, JA; Kirchhoff, F. Svært akut respiratorisk syndrom Coronavirus 2-vaccination øger den neutraliserende aktivitet mod sæsonbestemte menneskelige coronavirus. Clin. Inficere. Dis. 2022, 75, e653–e661. [CrossRef]

75. Simula, ER; Manca, MA; Jasemi, S.; Uzzau, S.; Rubino, S.; Manchia, P.; Bitti, A.; Palermo, M.; Sechi, LA HCoV-NL63 og SARS-CoV-2 deler genkendte epitoper af den humorale respons i sera af mennesker indsamlet før og under CoV-2-pandemien. Microorganisms 2020, 8, 1993. [CrossRef]

76. Chan, KH; Cheng, VCC; Woo, PCY; Lau, SKP; Poon, LLM; Guan, Y.; Seto, WH; Yuen, KY; Peiris, JSM Serologiske reaktioner hos patienter med alvorligt akut respiratorisk syndrom Coronavirus-infektion og krydsreaktivitet med humane Coronaviruss 229E, OC43 og NL63. Clin. Vaccine Immunol. 2005, 12, 1317-1321. [CrossRef]

77. Lin, H.-X.; Feng, Y.; Tu, X.; Zhao, X.; Hsieh, C.-H.; Griffin, L.; Junop, M.; Zhang, C. Karakterisering af spikeproteinet af humant coronavirus NL63 i receptorbinding og pseudotypevirusindgang. Virus Res. 2011, 160, 283-293. [CrossRef]

78. Heinz, FX; Stiasny, K. Distinguishing Features of Current COVID-19-vacciner: Kendte og ukendte for antigenpræsentation og virkemåder. npj Vacciner 2021, 6, 1-13. [CrossRef]

79. Martínez-Flores, D.; Zepeda-Cervantes, J.; Cruz-Reséndiz, A.; Aguirre-Sampieri, S.; Sampieri, A.; Vaca, L. SARS-CoV-2-vacciner baseret på spike glycoprotein og implikationer af nye virale varianter. Foran. Immunol. 2021, 12. [CrossRef]

80. Dolgin, E. Pan-Coronavirus Vaccine Pipeline tager form. Nat. Rev. Drug Discov. 2022, 21, 324-326. [CrossRef]